pi单阳管怎么会有三群细胞。。。

suntree0628

向各位求教：

1. 所用仪器为Beckman的moflo，经微球调试光路液路ok；

2. 上阴性细胞对照的图



2. FITC单染细胞


pi通道有两群细胞，可以理解为Fitc对pi通道的影响，补偿继续调节没有太大改善，所以就在此时的补偿基础上没有动；

3. PI单染细胞


pi通道华丽丽的出现了三群细胞。。。凋亡染色收集的仅为贴壁细胞，试验前PI染色15min，未洗，直接上机，求解{:soso_e136:}

4. 双染细胞



都说fitc+pi是凋亡检测的经典方法，我一直觉得此法随实验员及流式数据处理员的不同而给试验结果带来不同程度的影响，求好方法！！

niwanmao

你指的是PI单染这管三个门内均有细胞么？这么一点我觉得完全可以接受了，应该是一些非特异的信号。

suntree0628

niwanmao 发表于 2014-7-29 21:36
你指的是PI单染这管三个门内均有细胞么？这么一点我觉得完全可以接受了，应该是一些非特异的信号。 ...

额，不是。。。我指的是PI单通道直方图里有三群细胞，不知道是什么情况，比较纠结的人，没办法。。。。

niwanmao

suntree0628 发表于 2014-7-30 09:36
额，不是。。。我指的是PI单通道直方图里有三群细胞，不知道是什么情况，比较纠结的人，没办法。。。。 ...

哦，你指的是那三堆，很明显啊，PI直方图三堆细胞，中间的是AV补偿没调好漏过去的，表达最高的那堆是死细胞（PI＋）。

didi_zhou

排粘连体应该用同一个通道信号来源的A和W。

dragonhzqsmmu

ANNEIX V改用APC荧光试试？这样好像可以不用调节补偿