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[视频] 流式细胞术周期分析

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发表于 2015-1-20 13:28:15 | 显示全部楼层 |阅读模式

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简要介绍:
哺乳动物细胞周期分析是流式细胞术在20世纪60年代开始应用于研究的,属于最早的应用之一。检测细胞周期相对来说比较简单,只要用染料标记细胞DNA,然后检测其荧光强度即可。但是在其中还是需要考虑很多细节:
  • 如何使染料进入细胞?
  • 需要固定或破膜吗?
  • 需要染活细胞的DNA以便我们根据周期分选吗?
  • 目前有许多DNA结合染料可用,我应该选择哪种染料?
  • 如何设置流式细胞仪,以便能够正确测量单个细胞的DNA?
  • 如何分析DNA直方图?手工分析还是自动分析?
  • 单参数DNA周期分析的优点和缺点?


在本视频中,你可以找到这些问题的答案。虽然是英文,但相信结合视频里的PPT,不会很难看懂。

关键幻灯的视频截图(8幅):
1、整个讲座的提纲:我们为什么要分析细胞周期;DNA结合染料有哪些;影响实验成功的因素包括样本和流式细胞仪;跑样本的一些实战技巧
2015-01-20_130235.gif

2、细胞周期的应用领域:药物研发;癌症诊断和预后评估;发酵(酵母细胞周期);植物DNA研究;精子分选;细胞周期分选。 2015-01-20_130329.gif

3、DNA结合的染料,主要有:碘化丙碇;溴化乙碇;Hoechst染料、青花素染料(如TO-PRO-3、SYTO/SYTOX)、吖啶橙染料、派若宁、苯乙烯基染料(如LDS-751)、光神霉素、7-放线菌素D、DAPI、DRAQ5、DRAQ7等。
2015-01-20_130411.gif


4、常见的几种DNA结合的染料可按照激发波长、结合的特异性、是否染活细胞等进行分类。
2015-01-20_130534.gif

5、固定或破膜?各有优点
2015-01-20_130641.gif

6、导致细胞周期结果异质性的原因不少,有生物学本身的,也有激光器校准方面的、流体学、样本制备、染料方面的,这些内容是视频中的重点,讲得最多,并且附带了一些实例加深印象。
2015-01-20_130830.gif


7、跑样本上需要画的几个散点图:
2015-01-20_130840.gif

8、分析时需要遵循的设门步骤
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视频观看(登录后可见):
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 楼主| 发表于 2015-1-21 08:44:41 | 显示全部楼层
simnprince 发表于 2015-1-20 23:35
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我这边的网络能播放,而且速度很快。不知道你那边是什么网络?
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发表于 2021-9-26 07:14:38 | 显示全部楼层
这个视频看不了,有新的播放地址?谢谢
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