测IFN-gamma圈门问题

zuo-frnk

样品是小鼠脾脏。PE-IFN-gamma和apc-cd4进行双标，先apc-cd4进行表面染色在固定破膜染PE-IFN-gamma后上机检测，脾脏细胞有2群，见图片。不知道哪群对。

112358answer

经过固定破膜处理的细胞经常会出现淋巴细胞分成两群的情况（有说法是因为固定不充分），一般我会把SSC和FSC电压调稍小一点，能看出单核细胞和粒细胞，这样能辅助确定淋巴细胞。我觉得这里你应该两群都圈，再进行分析。

wxd

因为样品是小鼠脾脏，里边有各种细胞，直接用CD4有可能结果不准。还是建议先用CD3圈出T细胞，然后再分析CD4和IFN-γ。