CD3和CD4/CD8 T细胞

靖传旭

niwanmao 发表于 2022-11-15 18:07
Amine reactive dyes: An effective tool to discriminate live and dead cells in polychromatic flow c ...

老师，我想做CD3的RO，能不能不圈CD3直接圈CD4和CD8啊，因为CD3抗体跟我要测的东西可能有表位重叠

niwanmao

靖传旭 发表于 2022-11-16 14:13
老师，我想做CD3的RO，能不能不圈CD3直接圈CD4和CD8啊，因为CD3抗体跟我要测的东西可能有表位重叠 ...

因为CD4也会表达在单核细胞上，虽然强度偏弱，但区分也是困难的，所以T系标记还是有必要加。

如果CD3跟你要检测的指标表位有重叠，可改成其它T系标记，如CD5

萤火鱼

niwanmao 发表于 2019-11-13 14:13
要证明，我倒觉得你们自己的图更关键，只要你的CD4分群明显，荧光强度高，谁也否认不了。 ...

倪老师好，如果我分选CD4+T细胞，后面想要破膜染胞内细胞因子的话，由于CD4会内吞，我可以直接染CD3吗，还是也需要染CD3和CD8，然后反圈？

niwanmao

萤火鱼 发表于 2023-5-23 22:22
倪老师好，如果我分选CD4+T细胞，后面想要破膜染胞内细胞因子的话，由于CD4会内吞，我可以直接染CD3吗， ...

分选完测一下，纯度高，逻辑上可以直接染。

萤火鱼

niwanmao 发表于 2023-5-24 13:54
分选完测一下，纯度高，逻辑上可以直接染。

请问纯度达到多少可以直接染呢，我主要测的是胞内IFN-γ和IL-17A

niwanmao

萤火鱼 发表于 2023-5-24 14:48
请问纯度达到多少可以直接染呢，我主要测的是胞内IFN-γ和IL-17A

这个纯度多少没有规定，但是如果你要让别人信服，90％以上总是最起码的吧。

萤火鱼

niwanmao 发表于 2023-5-24 19:59
这个纯度多少没有规定，但是如果你要让别人信服，90％以上总是最起码的吧。 ...

我测了是98%以上，谢谢倪老师的回复！