请问测细胞内 IFN-γ必须加PMA和ionomycin吗

suriro

请教一下，我做的是有药品能刺激CIK 细胞分泌IFN-γ, 假如加了PMA和ionomycin会不会改变Ifn的量而反应不出趋势？看其他地方说“所有的T细胞亚群在TCR信号刺激下的增殖速度是一致的，所以在在体外进行PMA和Ionomycin刺激后，仍然反映的是T细胞亚群在生物体体内的原始比例。” 但是我这里不检测比例，只想看量的变化，不知道到底要不要加呢？

niwanmao

你要评估的是药品刺激CIK细胞的IFN-γ分泌能力，那么我个人觉得是不应该加PMA+离子霉素的，而是应该把PMA+离子霉素作为阳性对照。
至于Brefeldin A，药品和阳性对照都应该加，避免IFN-γ被分泌到细胞外。

suriro

niwanmao 发表于 2020-4-5 21:40
你要评估的是药品刺激CIK细胞的IFN-γ分泌能力，那么我个人觉得是不应该加PMA+离子霉素的，而是应该把PMA+ ...

谢谢老师！我也觉得这样有道理，但是我看了几篇相关文章 有的加了有的没加，看其他人说不加pma+离子霉素可能测不出细胞因子分泌 等我做了实验看看

tiger

suriro 发表于 2020-4-9 17:49
谢谢老师！我也觉得这样有道理，但是我看了几篇相关文章 有的加了有的没加，看其他人说不加pma+离子霉素可 ...

评估药品刺激CIK细胞的IFN-γ分泌能力，我感觉应该测胞外的IFNr的浓度。

suriro

tiger 发表于 2020-4-10 08:42
评估药品刺激CIK细胞的IFN-γ分泌能力，我感觉应该测胞外的IFNr的浓度。

因为有实验组里有树突状细胞和cik，要是直接测上清ifn，是不是就是测的树突细胞和cik共同分泌的，不能直接检测cik单独分泌

niwanmao

suriro 发表于 2020-4-21 18:42
因为有实验组里有树突状细胞和cik，要是直接测上清ifn，是不是就是测的树突细胞和cik共同分泌的，不能直 ...

如果有两种细胞存在的话，是否用特异性标记将两种细胞分开，测胞内IFN会比较好。