新人求问，流式检测ROS的问题

qihao309

各位老师好，最近反复做了几次流式检测细胞内ROS，染料是DCFH-DA
浓度2mM 孵育时间30分钟，结果如下,1是NC组，2是ros阳性组，3是ros阳性+清除剂组
对于这样的结果有几个问题
1：虽然降低了染料浓度，以前是用的10mM，但是FITC通道的值仍然很高，在10 ^5左右（增益已经调到最低），我看文献中大多是1000左右，并且在之前的实验中发现，值很高的时候会出现假阳性，导致本该有差异的分组没有差异了，是否应该降低孵育时间？
2：最终合并的histogram图并没有明显的峰的左右移动，反而峰的高低和宽度有明显差异，这是表示什么意思呢？我圈中的细胞数也大致相等，并且计算出来得Genomic mean好像也相差不多，这样的结果如何解释？
谢谢各位老师不吝赐教！

niwanmao

这应该已经有趋势了，阳性对照的ROS最高，ROS清除后就降低。
因为阳性+清除这组不像正态分布，而且NC组左边也有贴边的峰，所以建议圈中整个大的峰之后，看其Geomean 或Median值。

yjy123

说的真好，学习了