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[结构和原理] 间接法结合检测,抗体浓度

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 楼主| 发表于 2022-9-15 21:14:40 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
本帖最后由 飞翔 于 2022-9-17 06:51 编辑

最近进行流式间接法进行抗体结合梯度检测,细胞铺板后,一抗由高浓度进行梯度稀释4℃孵育1h,清洗后加二抗孵育0.5h,清洗后上机检测,由500ug/ml进行梯度稀释,高浓度点结合异常,可能是什么原因呢,一抗浓度太高了吗?

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Ab2第一点

Ab2第一点
Ab2-4.jpg

Ab2第7个点

Ab2第7个点

Ab2第10个点

Ab2第10个点
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发表于 2022-9-16 08:00:55 | 显示全部楼层
主要是Ab2出现,其它三个单抗看起来还是可以的。
Ab2的图形能看一下吗?
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 楼主| 发表于 2022-9-17 06:53:14 | 显示全部楼层
本帖最后由 飞翔 于 2022-9-17 21:21 编辑
niwanmao 发表于 2022-9-16 08:00
主要是Ab2出现,其它三个单抗看起来还是可以的。
Ab2的图形能看一下吗?

补充了图片,按这个图像是高浓度非特异性结合吧,起始浓度33ug/ml以下比较好
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发表于 2022-9-17 21:39:12 | 显示全部楼层
飞翔 发表于 2022-9-17 06:53
补充了图片,按这个图像是高浓度非特异性结合吧,起始浓度33ug/ml以下比较好 ...

标本应该同时包括阴性群和阳性群才行啊,否则非特异性增高,也容易被误认为好事了。
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 楼主| 发表于 2022-9-18 06:20:50 | 显示全部楼层
是的,是高表达细胞系都会结合,特殊高,按理细胞固定的细胞表面表达的受体数量一致,饱和后上平台会一致呀
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