为何我的分选效率这么低？

zyn90813

各位大神，我这次分选为啥效率这么低，分了一分钟只有8个，但是右边圈门里边，这一群细胞是很多的，是哪里出了问题吗？液流是稳定的

niwanmao

是否分选参数的问题？之前有做过类似的分选吗，效果如何

zyn90813

niwanmao 发表于 2023-10-17 13:39
是否分选参数的问题？之前有做过类似的分选吗，效果如何

倪老师，这台机器分选其他样品的时候，没有出现这种情况，回收效率也正常。还有一个细节，就是如果我不去黏连细胞，直接在FSC/SSC下按照P3和P4的圈门来分选，那么效率又是正常的，很奇怪

niwanmao

zyn90813 发表于 2023-10-17 13:52
倪老师，这台机器分选其他样品的时候，没有出现这种情况，回收效率也正常。还有一个细节，就是如果我不去 ...

哦，那看来是粘连体的问题，只能不设了。

hezeljgouc

有可能是因为，去粘连体FSC-H/FSC-A的门有一部分画到0以下了，你可以试试改一下这个门的边界，不要有小于0的部分

Fusca

如上一楼所说，应该是因为楼主P1画到0以下去了。具体的解释在Aria的各版用户手册里的分选部分和trouble shooting里都有详细的解释。简单来说就是BD（至少Aria系列和Fusion）的分选只基于log轴，在使用双指数轴圈门的时候仍然会转换成log轴来分选。因此圈了0以下会严重影响分选的结果（在实际听到的案例里，圈的到0以下很多的时候机器就基本分不到东西）。另外这些机器圈门的时候还可以注意不要用直方图圈门分选要用散点图（也会分不出来，见下图snap-to gate警告）和荧光信号一定用A分不要用H（有时会少分很多）。具体原理在手册里都有一定讲解，没事可以多翻翻。

原文截图如下，供参考

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