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张你你 发表于 2025-2-8 10:36 以后同一个问题,在同一个帖子上讨论。 我不知道你用的是什么标记进行磁珠和流式分选,分选之前的图形是什么样的,这两个证据都很关键。如果分选前也是这样的图形,已经说明了CD3和CD8的抗体性能不好,没分开。 |
受益匪浅 |
本帖最后由 张你你 于 2025-2-6 10:39 编辑 倪老师!正好有个人CD8+T细胞的问题想请教。 步骤: 第一天:48孔板铺1e5的人CD8+T细胞,然后用1640全培养基(100mM丙酮酸钠、谷氨酰胺、1X的双抗、1ug/mL anti-human CD3/CD28)激活两天 第三天:补液200uL(刺激耗竭) 第五天:补液200uL(刺激耗竭) 第六天:流式检测 请问PD-1和TIM-3的流式图这样子圈双阳的话,正确吗? 以及PD-1和TIM-3这样处理后CD8+T耗竭的比例大概有多少呢? 跪谢 |
张你你 发表于 2025-2-6 10:37 第一个图是FSC/SSC的话,左侧大量细胞死亡或凋亡状态,对于分析PD-1和TIM3的话我觉得不能圈的 |
还有一个问题倪老师,就是我圈了这群细胞后发现他在CD3和CD8的门下还分了几群细胞,但是这些细胞我是用磁珠和流式都分别分选后的,请问这是什么情况啊? |
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