细胞因子检测

112358answer

实验室在做细胞因子检测时，一般会用Cell activation cocktail(with Brefeldin A)对细胞进行处理，但是我比较困惑其中的PMA/ion会对细胞状态有影响，不能真实反映体内情况。文献中说：PMA/iono is usually a stronger inducer of cytokine expression compared to CD3/CD28 stimulation. While it might be argued that this trigger is not  hysiological, it is very well suited to reveal the maximal cytokine expression potential of the T cells rather than their actual cytokine expression e.g. in vivo at the time point of analysis.  



所以平时实验中老师们做细胞因子检测时一般用什么处理细胞呢？仅用BFA还是也含有PMA/ion之类的刺激剂？

niwanmao

说的没问题啊，PMA/Iono就是为了评估细胞的功能，尽可能把细胞功能榨干，从而把不同T细胞功能亚群分出。
要真实反映细胞体内情况，任何模拟都无法实现。

112358answer

niwanmao 发表于 2019-10-31 08:02
说的没问题啊，PMA/Iono就是为了评估细胞的功能，尽可能把细胞功能榨干，从而把不同T细胞功能亚群分出。
要 ...

那么在检测Th1亚群和（与抗原肽共孵育）检测抗原特异性CD4+ T细胞时，由于都是检测胞内IFN-γ的表达，如何区分二者呢？我现在的理解是前者加PMA/ion+BFA，后者只加BFA，这样对吗？

niwanmao

112358answer 发表于 2019-10-31 09:10
那么在检测Th1亚群和（与抗原肽共孵育）检测抗原特异性CD4+ T细胞时，由于都是检测胞内IFN-γ的表达，如 ...

你里面已经说了，与抗原肽的孵育，是抗原特异性T。
PMA和离子霉素刺激的是所有T。