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要同时染Annexin V和CD分子,我应该怎么做?

发布者: niwanmao | 发布时间: 2020-5-14 17:59| 查看数: 108| 评论数: 3|帖子模式

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最近,一位站友问道:
我想请问一下,Annexin V/PI和CD57之类的表面标记物一起检测的话,染色的时候先后顺序要怎么做呢?

这个问题,对于科研做的比较深入的FLOWER,确实是无法逃避的。因为无论如何,我们用的大多数样本都是混合的细胞,除非是细胞株。而且,有时候在研究细胞凋亡的同时,还希望能同时研究细胞的功能性标记。只有这样,才能充分发挥流式的多参数优势。
Annexin V是一种36kDa的钙离子结合蛋白,可与凋亡细胞外翻的磷脂酰丝氨酸(PS)结合,从而可以检测出凋亡细胞。因此用于检测Annexin V的也是抗体,只不过结合环境需要钙离子参与。
那么,其实我们就可以按下列步骤做染色上的调整:
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最新评论

RIVA 发表于 2020-5-19 11:04:41
固定破膜后,PI就染上了。不固定破膜又染不上细胞内抗体。这种真的可以做av+pi染色么?
RIVA 发表于 2020-5-19 11:06:14
另外我想做外周血的白细胞凋亡检测,是不是用av 7-aad会好点,溶血素能用么?用的话是不是用不含固定剂的。
niwanmao 发表于 2020-5-19 13:01:53
RIVA 发表于 2020-5-19 11:04
固定破膜后,PI就染上了。不固定破膜又染不上细胞内抗体。这种真的可以做av+pi染色么? ...

上面说了,如果要固定破膜,改用针对活性胺的死活染料。

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