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谢谢老师分享,抗体过量、抗体与Fc受体结合,以及死细胞所造成的非特异性荧光。 |
再做同型对照的时候,可以将抗体单独加入染色并作为同型对照是吗? 我看有的会特别去加入特定的同型抗体?我这样的设计会有问题吗?谢谢 |
immunology1988 发表于 2020-6-28 11:19 这段话的意思我不太明白。 |
niwanmao 发表于 2020-6-28 11:26 染色表面因子或胞内因子的时候,我通常就是将两种或多种抗体因子混合加入。同型对照:单独加入抗体染色。不好意思,老师,前面的表述不清楚。请老师悉心指教!!! |
immunology1988 发表于 2020-6-29 09:47 你的意思是,做胞内因子的同型对照时,只加入表面标记,而不加入胞内因子抗体? 那不叫同型对照,如果是只去掉一个胞内因子抗体则叫FMO对照。如果是多个胞内因子抗体都不加,则是「乱对照」 |
niwanmao 发表于 2020-6-29 10:07 做胞外表面因子时,通常我是将表面抗体混合后加入样本标记,胞内也是同样。也就是单标和混标吧。不知道我这样对不对! |
老师,2的情况 可以用BSA吗进行特殊细胞Fc段的封闭吗? 我们实验室并没有采用什么特殊的封闭药,只是在免疫双标染色时加入了Triton和BSA混合液 效果也不错,但是做流式好像没用过封闭液,都是直接做得空白对照和ISO对照,是不是这样就不需要加入封闭液了?还是我们做的不规范? |
345641775 发表于 2020-6-29 15:25 Triton可以破膜,做表面标记你们那边也加这个吗? 一般如果非特异性染色不明显的,不用BSA也是可以的。 |
niwanmao 发表于 2020-6-29 21:07 是的,老师说protocol是在他之前在免疫实验室用的,做的是免疫荧光双标的,流式的确实从来没做过封闭。老师说有对照组就可以了。 |
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