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用于监测自身免疫性疾病抗CD20治疗效果的ISCCA流式方案

发布者: niwanmao | 发布时间: 2020-7-16 22:23| 查看数: 686| 评论数: 2|帖子模式

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抗CD20单克隆抗体(MoAb)用于多种自身免疫性疾病。目的是消除那些导致组织损伤和致病性自身抗体产生的记忆B细胞,同时保留Naive B细胞。记忆B细胞的消失和Naive B细胞的补充与良好的临床反应相关,而记忆B细胞和成熟浆细胞的重新出现,则与复发或对治疗的耐药性相关。
抗CD20治疗后,会导致极低的B细胞水平,需要高分辨率流式技术。这里介绍一个由意大利临床细胞分析学会(ISCCA)推荐的免疫监测方案,用于为自身免疫性疾病抗CD20治疗期间的临床决策过程提供标准化方法。

方案
八色方案,10个抗体组成,包括(CD20-V450,CD45-V500c,CD4-FITC sIgM-FITC,CD38-PE,CD3-PerCP Cy5.5,CD19-PE-Cy7,CD27-APC,CD8 -APC H7 ,sIgG-APC-H7),区分B细胞、浆细胞/浆母细胞、Naive B和记忆B细胞、sIgM和sIgG转换记忆B细胞、T和NK细胞,并能进行高灵敏度分析(> 106 CD45+细胞)。


设门方法
20200716_221741.jpg


抗CD20治疗后,大多数患者的B细胞水平几乎为零。如果B细胞实际上仍然不存在(<0.1个/μl),则B细胞亚群的评估既不可靠也不有意义。如果B细胞升高到>0.3-0.5个/μl,则可以分出亚群且提供预后相关信息,但需要获取到足够的CD45+细胞数(>1.0-1.5×106)。如果B细胞比较容易检测到(>1个/μl),记忆B细胞明显存在,则表明无反应或可能复发。
所以以后对自身免疫性疾病患者进行标准化前瞻性监测的时候,建议采用ISCCA方案,以帮助安全合理地使用抗CD20疗法。

信源:Gatti A, Buccisano F, Scupoli MT, Brando B. The ISCCA flow protocol for the monitoring of anti-CD20 therapies in autoimmune disorders [published online ahead of print, 2020 Jun 29]. Cytometry B Clin Cytom. 2020;10.1002/cyto.b.21930. doi:10.1002/cyto.b.21930

最新评论

qingfengguo68 发表于 2020-7-23 11:01:33
您好倪老师,请教您,流式检测因子为什么会有那么多粘连(a中第二幅图)。是抗体间会产生吸附么?
niwanmao 发表于 2020-7-24 07:34:27
qingfengguo68 发表于 2020-7-23 11:01
您好倪老师,请教您,流式检测因子为什么会有那么多粘连(a中第二幅图)。是抗体间会产生吸附么? ...

粘连的产生不可避免。
你这里所说的检测因子,是指CBA法检测血清细胞因子吗?如果是的话,可能是微球未充分打散。

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