因为我要做细胞焦亡相关的实验，其中一个就是要检测细胞膜上形成了可通透的10-15nm的孔道（实验室没条件做电镜），我看了一些文献，他们都有用过PI染色，有孔的细胞膜能通透PI。
我此前没做过流式相关的实验，纯新手一个，所以有一些疑惑，希望能得到各位老师的指导。
第一个疑惑：我出于检测膜完整性的目的，做PI染色时，是不是要先染色再固定细胞，最好上流式？
第二个疑惑：我该怎么操作才能区分地显示出染色和无染色的细胞（显示染色细胞的占比）？
第三个疑惑：请问有没有其他的染色方法可以更好地判断膜的不完整性？

希望能得到各位老师的指导，万分感谢！

我这边的流式是这个

@niwanmao 老师您好，请问您方便指导一下吗，谢谢

焦亡的话，建议你参考我之前发过的那个帖子做流式：https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5431-1-1.html