新手cytoflex细胞周期去黏连门结果疑问

exosea

大佬们帮忙分析一下结果吧,用的胶质瘤细胞系1.去黏连的ECD-A ECD-H 没有出现线性的细胞群是什么原因？去黏连线性门的原则是什么呢
2.P1门细胞群电压是否偏低？


3.MODFIT分析出来G1 G2峰连在一块是什么原因呢

exosea

步骤是不含EDTA酶消化以后收集，PBS洗一次；加入0.3ML 去离子水重悬以后加入到0.7ML无水乙醇中混匀4度过夜，上机之前PBS洗去乙醇，用的索莱宝的试剂盒，100ul RNASE 37度水浴30MIN， 400ul PI 4度避光30MIN以后上机

niwanmao

exosea 发表于 2022-7-28 19:57
步骤是不含EDTA酶消化以后收集，PBS洗一次；加入0.3ML 去离子水重悬以后加入到0.7ML无水乙醇中混匀4度过夜 ...

50以上为何被切掉了？

做应该是对的，就是这些信号有点怪。

exosea

niwanmao 发表于 2022-7-28 20:24
50以上为何被切掉了？

做应该是对的，就是这些信号有点怪。

是的ni老师，老师能分析一下为什么去黏连门细胞线性差吗

niwanmao

exosea 发表于 2022-7-28 20:31
是的ni老师，老师能分析一下为什么去黏连门细胞线性差吗

你问一下工程师看看，是不是哪里设置上出了问题，导致50以上的信号被切了？

闷油瓶

niwanmao 发表于 2022-7-28 21:23
你问一下工程师看看，是不是哪里设置上出了问题，导致50以上的信号被切了？ ...

ECD通道也可以用来去粘连？

niwanmao

闷油瓶 发表于 2022-7-28 21:54
ECD通道也可以用来去粘连？

能接收到荧光的通道均可。

闷油瓶

niwanmao 发表于 2022-7-29 10:05
能接收到荧光的通道均可。

好的，谢谢，我还以为去粘连只能从分析形态的散射光通道操作呢，荧光通道的方法和FSC SSC是一样的吧？

niwanmao

闷油瓶 发表于 2022-7-29 11:27
好的，谢谢，我还以为去粘连只能从分析形态的散射光通道操作呢，荧光通道的方法和FSC SSC是一样的吧？ ...

方法一样的。
不过荧光通道排除粘连，主要是用于细胞周期分析。

wwwhy

niwanmao 发表于 2022-7-29 16:21
方法一样的。
不过荧光通道排除粘连，主要是用于细胞周期分析。

老师您好，您的意思是一般只有细胞周期用荧光通道去黏连吗，比如染的PI，用PE-H和PE-A来去黏连，为什么不能用FSC-H和FSC-A来去黏连啊？