新人求助人外周血PBMC流式图像

xiaoxiao0217

我用lymphoprep和sepmate分离2ml新鲜肝素抗凝血中的PBMC，过程顺利的，但是跑出来的FSC/SSC图像（图1）像外周血，另外一个用同样方法提PBMC的同学跑出来的是图2，请教各位可能是哪里出了问题？

niwanmao

你这个提取的比较好，中性粒有时候是去不干净的。

图2提取的不好，因为首先单个核细胞很少，其它大多数都是凋亡和碎片，可能他吸取的时候没吸对。

xiaoxiao0217

谢谢倪老师回复！但是因为我想观察的是低密度粒细胞（LDG），在文献中这群细胞是在PBMC里的，用CD15hiCD14lo/negCD86-HLA-DR-CD10+
来鉴定，但如果我提的PBMC本身就混有没分离干净的中性粒的话，那我该怎么鉴定出LDG这群细胞呢？

srfts

xiaoxiao0217 发表于 2022-8-15 09:33
谢谢倪老师回复！但是因为我想观察的是低密度粒细胞（LDG），在文献中这群细胞是在PBMC里的，用CD15hiCD14l ...

你在圈PBMC时，不把粒细胞圈进来就可以了，只圈下面两群

xiaoxiao0217

srfts 发表于 2022-8-15 10:19
你在圈PBMC时，不把粒细胞圈进来就可以了，只圈下面两群

那这样做是不是和直接用外周血做就一样了？

niwanmao

xiaoxiao0217 发表于 2022-8-15 09:33
谢谢倪老师回复！但是因为我想观察的是低密度粒细胞（LDG），在文献中这群细胞是在PBMC里的，用CD15hiCD14l ...

你分出的就是低密度的粒细胞。