流式分选能否根据两种荧光强度的比值大小来分选细胞群？

qianzhi1517

如题，假设细胞内有两种荧光A和B，能否利用A/B这个比值来进行细胞分选？而非通过单纯一种荧光A或B来分选。如果可以，怎么实现划门呢？

niwanmao

我没做过分选，只能凭自己的理解回答一下吧，未必正确：
对于分群不清的群体，流式分选的纯度会比较差。
同理，如果荧光本身分不开，通过比值来分，即使能行，纯度应该也不会高。是否有此分选功能，需要各位做分选的FLOWER来回答一下。

qianzhi1517

niwanmao 发表于 2022-9-26 16:22
我没做过分选，只能凭自己的理解回答一下吧，未必正确：
对于分群不清的群体，流式分选的纯度会比较差。
同 ...

谢谢您的回复。我可能需要补充一下问题：两种荧光是可以分开的。我需要用其中一种荧光的强度作为背景荧光，或者说是起到“内参”作用，所以需要用比值鉴定分离细胞。

niwanmao

qianzhi1517 发表于 2022-9-26 16:56
谢谢您的回复。我可能需要补充一下问题：两种荧光是可以分开的。我需要用其中一种荧光的强度作为背景荧光 ...

内参的荧光强度也是在变化的？那样的话，就不算内参了。

qianzhi1517

niwanmao 发表于 2022-9-26 18:11
内参的荧光强度也是在变化的？那样的话，就不算内参了。

是的，不应该叫做内参，只能说是一种细胞内荧光的基准，随细胞本身的特异性变化