单核细胞亚群划门的参照？同型对照or阴性对照？

huming · 发表于 2022-11-6 20:31:07

本帖最后由 huming 于 2022-11-6 20:38 编辑

请问分析人外周血单核细胞亚群，圈完CD14阳性之后，应该怎么去划分成三个亚群呢？是按照同型对照划门吗，还是按照阴性对照划门？或者是细胞群的形态？如果是按照同型对照的话，是以相同的数值划门还是同型的十倍呢？

崔娟娟 · 发表于 2022-11-14 17:36:24

参考如图所示

niwanmao · 发表于 2022-11-14 21:02:48

CD14/CD16的三个亚群，是很容易通过分群区分的。不难的。

huming · 发表于 2022-11-16 13:24:01

本帖最后由 huming 于 2022-11-16 13:37 编辑

谢谢倪老师和站友的解答，左侧是健康人的单核细胞亚群，右侧是患者的，感觉患者们的亚群总是各种奇奇怪怪的

，那请问倪老师这个亚群界限的划分，我的想法是例如前两张图是按照前面这张，后两张图是按照右侧的那张，这样是对的吗？有时候还会遇到细胞在CD16的下线特别多（淋巴细胞和单核细胞都是这样），如果是因为抗体加多了，那这样的数据是不是就要舍弃掉了呢？

niwanmao · 发表于 2022-11-16 20:40:14

huming 发表于 2022-11-16 13:24
谢谢倪老师和站友的解答，左侧是健康人的单核细胞亚群，右侧是患者的，感觉患者们的亚群总是各种奇奇怪怪的 ...

看不到你的上级门是如何设置的，需要从样本新鲜程度、上级门是否充分排除了其它细胞等因素去找原因。

huming · 发表于 2022-11-16 21:01:58

niwanmao 发表于 2022-11-16 20:40
看不到你的上级门是如何设置的，需要从样本新鲜程度、上级门是否充分排除了其它细胞等因素去找原因。 ...

倪老师，一般我都是根据同型对照先框出CD14阳性，（第一行图2）然后带到阳性样本中，再根据单核细胞三个群的形态圈门，但有时候感觉图是歪的，有时候看经典型和中间型连在一起分不清楚。不知是患者疾病的原因还是自己划门的问题，通常患者的非经典型比例很少，长得这么顺眼的图很少。样本一般两三个小时就做了

niwanmao · 发表于 2022-11-17 20:42:41

huming 发表于 2022-11-16 21:01
倪老师，一般我都是根据同型对照先框出CD14阳性，（第一行图2）然后带到阳性样本中，再根据单核细胞三个 ...

分群好的和分群不好的，能否各传一个FCS 文件上来？

huming · 发表于 2022-11-22 10:48:25

本帖最后由 huming 于 2022-11-24 16:01 编辑

分群清晰01-20221026A-wch.zip (8.97 MB, 下载次数: 7)

C01阴性对照 LQ.zip (1.64 MB, 下载次数: 3)

C02同型.zip (7.94 MB, 下载次数: 3)

C03双染.zip (7.96 MB, 下载次数: 2)
倪老师，我挑了一下最后选了两个样本，大文件传不上来，所以分群有疑问的那个样本拆成了三个压缩包，我想请教的点有几个，例如在分群清晰那个样本里，最后应该是怎么划界分开经典型和中间型，大概是接近10^3还是10^4的那个位置呢，和同型对照有关系吗？另外第二个样本，感觉上方APC高表达的部分是歪的，正常来讲应该是水平的才对吧，那部分应该是代表中间型还是非经典型呢，如果是非经典型，是否说明需要进行补偿的正确调节？样本是提的PBMC，抗体是pe-CD14、APC-CD16，因为这两个谱系似乎离得比较远，所以只是在很久以前做了一次补偿，两个通道之间的补偿数值一个是2.6%，一个是0.04%，就这样一直用下来了。。。

huming · 发表于 2022-11-22 11:01:59

本帖最后由 huming 于 2022-11-24 16:01 编辑

再补充一例，这个是一个细胞数比较多的样本，经典型和中间型之间没什么空隙，也是想知道这个界限如何画比较合适~谢谢倪老师！

18371799856 · 发表于 2022-11-22 19:28:22

打不开啊

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