巨噬细胞流式检测

ccx793244586

各位战友，大佬们好。

我想请教一下，巨噬细胞的流式检测，主要是检测M1/M2/Mreg
对于不同巨噬细胞，细胞系：RAW264.7、THP-1、J774A.1或原代细胞：BMDM、HMDM、PM
这些不同的细胞进行细菌、细菌肽/蛋白或化学物质的处理后，在检测实验方案可行以及实验操作没问题的前提下，是否上述巨噬细胞的实验都能检测出比较明显巨噬细胞分化？还是说上述哪些个巨噬细胞的分化不容易检测出（包括体内外实验）。
然后，也想问一下大家检测巨噬细胞分化及功能亚型，选择的细胞系主要是RAW264.7跟THP-1（PMA诱导后）吗？
流式检测效果如何，哪些M1/M2的指标比较难检测呢？
感谢！ 跪求赐教！

niwanmao

ccx793244586 发表于 2022-11-11 22:31
谢谢倪老师 这个帖子我有看过，然后想问一下，巨噬细胞系跟原代巨噬细胞的M1/M2检测差别会有多大呢，例如 ...

理论上说，你上面提到的三个细胞系，我比较熟悉的THP-1，这是一个白血病细胞株，不算严格的巨噬细胞系，只是可以通过特定条件诱导成熟为单核/巨噬，这样诱导出的，肯定会跟原代有所不同。但是其好处就是细胞源源不断，比较适合前期的条件探索。

条件探索建立成功后，再在原代巨噬细胞上确认验证。

niwanmao

主要是CD206不好染。

相关指标和步骤，可参考下帖中所附的参考文献：
巨噬细胞M1、M2分型的标记选择
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-9709-1-1.html
(出处: 流式中文网)

ccx793244586

niwanmao 发表于 2022-11-11 20:55
主要是CD206不好染。

相关指标和步骤，可参考下帖中所附的参考文献：

谢谢倪老师 这个帖子我有看过，然后想问一下，巨噬细胞系跟原代巨噬细胞的M1/M2检测差别会有多大呢，例如细菌感染后，细胞系的可塑性分化会不如原代巨噬细胞那么明显吗

ccx793244586

好的 谢谢倪老师！我也是打算先在细胞系RAW264.7上开始检测，再转到小鼠原代的BMDM