小鼠脾脏细胞分群问题

风萧易水

小鼠脾脏裂解后流式上机出现两种不同的形态。
1.图一是第一只荷瘤小鼠，只有一群细胞，都是淋巴细胞吗？
2.图二是第二只荷瘤小鼠，但是明显分两群细胞，两群都是淋巴细胞吗？
3.图三是无瘤正常的小鼠，也是一群细胞，先前看站友分享的脾脏淋巴细胞占78%，不知道我裂解的问题还是FSC阈值的问题。小鼠脾脏提取细胞上机流程和死活染色 - 科研应用 - 流式中文网 - Powered by Discuz! (flowcyto.cn)
步骤：
1.小鼠取脾，研磨，PBS冲洗，过70μm滤网；
2.400g离心5min，弃上清；
3.加入5mL红细胞裂解液（biosharp），室温避光裂解5min；
4.加入30mL PBS洗涤细胞，400g离心5min，弃上清，PBS调整细胞密度1e7/mL，上机。

niwanmao

这种分群上的差异，基本上都是跟单细胞解离时的操作手法差异有关。至于究竟淋巴是哪些，还是需要用CD3、CD19等标记确认，只凭FSC和SSC不是很适合确定群体性质的，单细胞解离本身就容易影响细胞形态。

风萧易水

niwanmao 发表于 2023-2-3 14:56
这种分群上的差异，基本上都是跟单细胞解离时的操作手法差异有关。至于究竟淋巴是哪些，还是需要用CD3、CD1 ...

好的，谢谢老师解答！