流式样本上机要求

飞翔

最近送测上机的样本，容易发生堵塞BD高通量设备HTS模块样本管的情况，已经要求处理后的细胞先进行100um细胞筛过滤，之后在孵育抗体，重悬细胞用1%BSA/1XPBS,上机时按BD CantoII板子上机建议细胞数量为0.1-1*1E6，重悬体积为50-200 ul ，上机板子材质使用聚丙烯材质(更低粘附），不要使用聚苯乙烯材质的细胞培养板等要求，还是有堵塞发生，大家有什么好的方法，或者对上机样本要求规范化要求的分享下

scaleus

试一下上机前过滤呢 我就遇到过没有处理好的组织样本 染色前已经过滤过 后面又出现黏连

飞翔

scaleus 发表于 2023-3-4 01:10
试一下上机前过滤呢 我就遇到过没有处理好的组织样本 染色前已经过滤过 后面又出现黏连 ...

我们是整板的，有点不是太方便，而且基本都是培养的肿瘤细胞，不行只能这么操作了

niwanmao

飞翔 发表于 2023-3-4 05:35
我们是整板的，有点不是太方便，而且基本都是培养的肿瘤细胞，不行只能这么操作了 ...

悬液时间长了，尤其是细胞量大的，确实容易发生沉淀和死亡，导致絮状沉淀。

所以我们这边一般是细胞量大的先上，细胞量少的可延到后面上。不过我们是用流式管，所以顺序调整相对好一些。

飞翔

niwanmao 发表于 2023-3-4 14:08
悬液时间长了，尤其是细胞量大的，确实容易发生沉淀和死亡，导致絮状沉淀。

所以我们这边一般是细胞量大 ...

倪老师，我们是整板的样本，都是让他们按要求数量铺板的，不过估计不少不那么干的，这种情况有啥好办法

niwanmao

飞翔 发表于 2023-3-4 16:05
倪老师，我们是整板的样本，都是让他们按要求数量铺板的，不过估计不少不那么干的，这种情况有啥好办法 ...

可以转移到流式管，分批处理。

也可用可拆卸的板条，一次处理两三条，这样一次上20~30个样本，还是相对好一点。

飞翔

niwanmao 发表于 2023-3-4 19:25
可以转移到流式管，分批处理。

也可用可拆卸的板条，一次处理两三条，这样一次上20~30个样本，还是相对 ...

这个检测的工作量太大，操作上很不便利，这个没什么好方法了呀，这个在正常1E6/ml细胞上样量不是很多吧，时间太长了吧，或者是1XPBS稀释的也会这样吧

niwanmao

飞翔 发表于 2023-3-4 20:32
这个检测的工作量太大，操作上很不便利，这个没什么好方法了呀，这个在正常1E6/ml细胞上样量不是很多吧， ...

如果一直有震荡防止沉淀，我觉得应该会好一点。

飞翔

niwanmao 发表于 2023-3-5 19:03
如果一直有震荡防止沉淀，我觉得应该会好一点。

这个没有这个设备

niwanmao

飞翔 发表于 2023-3-6 14:21
这个没有这个设备

有些流式细胞仪自动上样器，是有隔一段时间混匀的功能。