关于BD CBA 试剂盒方法学验证问题

儿玉源太郎

  实验室刚到一盒 BD CBA  Non-Human Primate Th1/Th2 Cytokine Kit 试剂盒，根据规定需要对其进行验证才能应用，想请教各位前辈，要选取非人灵长类动物什么样本(血清？全血？)或者对非人灵长类动物的血清(或全血)样本做怎样的处理才能进行验证实验呢？请教各位有相关的资料吗？？想要一个实验方案哈哈。

niwanmao

1、从标准曲线的线性度去判断。
2、选择阴性或阳性样本（可参考ELISA结果）确认。

儿玉源太郎

niwanmao 发表于 2023-3-27 16:31
1、从标准曲线的线性度去判断。
2、选择阴性或阳性样本（可参考ELISA结果）确认。

  站长您好！首先非常感谢您的回答，但我想要的是它试剂盒作正式试验前验证的实验方案，如果可以的话站长可以推荐一些相关文献的链接吗？再次感谢您！

niwanmao

儿玉源太郎 发表于 2023-3-27 19:18
站长您好！首先非常感谢您的回答，但我想要的是它试剂盒作正式试验前验证的实验方案，如果可以的话站长 ...

刚才说的就是验证的方案。这种不可能出现在文献中的。你没理解前面所说的方案？

Yuck

CBA参考ELISA就可以。做系统适应性验证就行，老师说的线性、专属性基本够了，多了的话可以再做个重复性。再有必要根据实验本身特征做范围验证，比如样本使用稳定性。

儿玉源太郎

niwanmao 发表于 2023-3-27 20:29
刚才说的就是验证的方案。这种不可能出现在文献中的。你没理解前面所说的方案？ ...

哈， 感谢指教，因为我是刚接触CBA，还没做过一次完整的实验，对CBA的认识仅停留在说明书和一些介绍资料上，请见谅！我还是先补习补习知识，再来提问探讨，非常感谢老师！

儿玉源太郎

Yuck 发表于 2023-3-28 08:44
CBA参考ELISA就可以。做系统适应性验证就行，老师说的线性、专属性基本够了，多了的话可以再做个重复性。再 ...

哈，因为我是刚接触CBA，还没做过一次完整的实验，对CBA的认识仅停留在说明书和一些介绍资料上，故并太懂楼上老师讲解之意，感谢指教！

niwanmao

儿玉源太郎 发表于 2023-3-28 15:14
哈， 感谢指教，因为我是刚接触CBA，还没做过一次完整的实验，对CBA的认识仅停留在说明书和一些介绍资料上 ...

可以先熟悉一下CBA试剂盒的说明书，还是容易上手的，里面第一步就是做标准曲线，通过标准曲线，基本上可了解到试剂性能。

wmj123456

niwanmao 发表于 2023-3-28 19:34
可以先熟悉一下CBA试剂盒的说明书，还是容易上手的，里面第一步就是做标准曲线，通过标准曲线，基本上可 ...

倪老师，关于CBA和ELISA，因为检测方法的不同，同一份样本的结果用CBA和ELISA检测，可能会出现差异吧？不同的检测方法，结果差异在多少，被认为是可接受的。像你们在临床上，不同厂家的CBA的结果是否也存在差异，该怎么解读数据

niwanmao

wmj123456 发表于 2023-3-28 21:32
倪老师，关于CBA和ELISA，因为检测方法的不同，同一份样本的结果用CBA和ELISA检测，可能会出现差异吧？不 ...

CBA和ELISA结果相差还是蛮大的，原因可能很多，我个人觉得主要是因为：
1、一些成熟的指标，检测体系灵敏度，CBA更胜一筹，原因在于CBA是计数微球表面结合的信号数量，而ELISA凭的是化学底物的整体信号强度。
2、个别因子CBA在抗体对上选择不够成熟，ELISA更好。


临床上，不同厂家的CBA试剂盒灵敏度是存在差异，所以需要进行多方比对，优中选优，结果务必结合临床症状，确认增高是否正确。目前看起来Luminex平台相对占优。