间充质干细胞的检测，应该做哪些内容？

niwanmao

间充质干细胞（MSC）是成体多能祖细胞，具有自我更新潜能和分化成各种特殊细胞类型的能力¹。 它们还具有免疫调节特性，可用于再生医学。 然而，MSC 并不是一种统一的细胞类型，它们的特性会因组织来源、分离方法和培养基成分而异。

流式细胞术可根据特定表面标记的表达来分离、识别和表征 MSC。  MSC 的最小表型模式要求 CD73、CD90 和 CD105 阳性，而CD14、CD34、CD45 和 HLA-DR 阴性。



然而，这种模式可能不足以将 MSCs 与其他细胞类型区分开来或评估它们的功能。 因此，可能需要额外的标记和测试来验证 MSC 的质量和效力。


反映MSC 质量的额外标记或测试包括：
- 反映组织来源或 MSC 起源的标记，例如用CD36确定脂肪来源的MSC、用CD271确定骨髓来源的 MSC、用CD146确定血管周围 MSCs。
- 指示 MSC 老化、衰老或效力的标记，例如端粒长度、端粒酶活性、p16INK4a 表达和线粒体膜电位。
- 与 MSC 的免疫调节或治疗潜力相关的标志物，例如 HLA-G、IDO、PDL-1、PDL-2 和 TSG-6。
- 使用特定诱导培养基和染色方法确定间充质干细胞向脂肪细胞、软骨细胞和骨细胞的分化潜能的测试。
- 使用集落形成单位 (CFU)、伤口愈合、管结构形成、免疫抑制和动物模型等测定法评估 MSCs 体外或体内功能的测试。

流式细胞术也可用于分析 MSC 的分泌蛋白质组，MSC可通过这些蛋白影响其他细胞。 分泌蛋白质组很重要的部分是细胞外囊泡 (EV)，来自 MSC 的 EV 可以通过调节炎症、血管生成、组织修复和免疫反应产生治疗效果。 流式细胞术可用于表征 EV 的大小、数量和表面标记，以及它们与靶细胞的相互作用。


参考文献：
(1) Human mesenchymal stem cells: from immunophenotyping by flow cytometry .... https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23027703/
(2) Isolation, cultivation, and characterization of human mesenchymal stem .... https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/cyto.a.23242
(3) Methods to Validate Mesenchymal Stem Cell Quality: R&D Systems. https://www.rndsystems.com/resou ... potency-and-quality
(4) Identification and validation of multiple cell surface markers of .... https://stemcellres.biomedcentra ... 6/s13287-016-0370-8
(5) Generation of mesenchymal stromal cells from cord blood: evaluation of .... https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5260040/