请问有人做过全血的流式吗，不裂红的那种

hydwl2019

我们做了一个荧光的纳米颗粒，理论上是结合凋亡细胞的，所以我取1ul全血加100ulPBS重悬，然后加CD45来区分红白细胞，然后用凋亡试剂盒检测凋亡细胞，这样的话看看纳米颗粒是结合凋亡的白细胞还是红细胞，但是昨天做实验什么荧光都没有，不知道什么原因，因为是全血所以没有离心洗涤，只重悬了，加了荧光抗体没有洗也直接测了，然后分群也感觉不对

niwanmao

横坐标和纵坐标分别是什么标记？

srfts

你先调大稀释倍数，大于1:500 。然后CD45占比太少了  CD45换CD235α（红细胞标记）试试。

hydwl2019

niwanmao 发表于 2023-4-8 15:23
横坐标和纵坐标分别是什么标记？

用的FSC和SSC

niwanmao

建议：
1、先上一管只有全血细胞的管子（不知道你们的纳米颗粒是结合红细胞还是白细胞，如果白细胞的话，则需要取100ul全血+3ml裂解液 裂解红细胞再上），确认靶细胞（红细胞？还是白细胞）位置。如果是红细胞，则FSC和SSC均设为LOG坐标，将红细胞群位置放在中间区域，如果是白细胞，则FSC和SSC在LOG坐标时，放在右上。
2、再上一管只有纳米颗粒的管子，看一下纳米微球所处的位置，FSC和SSC均用LOG。
3、如此，便清楚了两者之间的差异，此时，再做实验管。