T细胞培养的扩增，包被CD3/CD28

一叶子

我想问一下，有没有protocol，就是关于包被的CD3和CD28的货号，浓度，以及听说普通板子还包被不上，必须要吸附性的板子才行？有货号吗？

一叶子

希望已经成功过的友友分享一下，或者有啥大牛实验室的protocol

niwanmao

一叶子 发表于 2023-4-23 21:51
希望已经成功过的友友分享一下，或者有啥大牛实验室的protocol

以下是用 CD3包被板的详细方案，CD28另加。供参考：
1、准备一块平底的培养板，以下步骤仅针对活化孔，非活化孔不加CD3和CD28。
2、用无菌 PBS 配制 1 μg/mL CD3 抗体，将稀释后的 CD3 抗体以 2 mL/孔加入到培养板的各孔中。
3、在 5% CO2 和 37°C 下孵育板 2 小时。
4、2 小时后，从培养箱中取出孔板。 吸出抗 CD3 溶液并丢弃。 不要清洗培养板。
5、分离和制备要培养的细胞悬液，用完全 RPMI 1640 培养基调整浓度为 3 x 10E6 个细胞/mL，并加入 5 µg/mL anti-CD28，最后将细胞溶液均匀地分配到孔板上用抗 CD3 处理的孔中。
6、在 37°C 的 5% CO2 培养箱中孵育培养板 1-3 天。 第 1 天，细胞将产生转录因子和细胞因子。 大多数 T 细胞最多需要 3 天才能分裂。



信源：https://www.thermofisher.com/de/ ... -cd3-anti-cd28.html