做的凋亡，FITC没有染上是啥原因？

Zoravae

用的同仁的凋亡试剂盒，肿瘤细胞，发现FITC-PI没有染上？是啥原因啊？PBS用之前需要预冷吗？

图1：单染FITC,
图2：单染PI
图3：双染FITC+PI

wxd

从图片上看，很像是单染FITC和单染PI搞反了，并且你的图片没有去除细胞碎片和黏连细胞，可能会对结果造成干扰，圈门分析，确认一下单染管里那个阳性群是怎么回事。
或者你再染色一次，并且设置不染色管，确认是否是单染管搞错了。
如果确定单染没有错，有可能你的细胞确实没有凋亡，你需要换一种更强力的方式或者药物处理细胞，使其有相当一部分细胞凋亡。
如果细胞确实有凋亡，有可能是用了有EDTA的胰酶，没有清洗干净导致的。
有条件的话，换一个试剂盒试试，Annexin V-FITC染色需要专门的Annexin V结合液，跟PBS是否预冷关系不大。