求助贴之凋亡实验结果图

Zoravae

图依次为：
B1：加药细胞的空白组
B2：加药细胞的单染FITC组
B3：加药细胞的单染PI组
B4：加药细胞的双染组
B1-1:调了光补偿的B1
B2-1:调了光补偿的B2
B3-1:调了光补偿的B3
B4-1:调了光补偿的B4

B1：加药细胞的空白组

B2：加药细胞的单染FITC组

B3：加药细胞的单染PI组

B4：加药细胞的双染组

B1-1:调了光补偿的B1

B2-1:调了光补偿的B2

B3-1:调了光补偿的B3

B4-1:调了光补偿的B4

D1：未处理细胞的空白组
D2：未处理细胞的单染FITC组
D3：未处理细胞的单染PI组
D4：未处理细胞的双染组
D1-1:调了光补偿的D1
D2-1:调了光补偿的D2
D3-1:调了光补偿的D3
D4-1:调了光补偿的D4

D1：未处理细胞的空白组

D2：未处理细胞的单染FITC组

D3：未处理细胞的单染PI组

D4：未处理细胞的双染组

D1-1:调了光补偿的D1

D2-1:调了光补偿的D2

D3-1:调了光补偿的D3

D4-1:调了光补偿的D4

实验过程：收集培养液，PBS洗，无EDTA胰酶消化，PBS洗+1000转离心5min（重复3遍）,适宜的细胞数量用纯净水稀释的10*的bingding重悬细胞，用同仁的调往试剂盒，加5uLFITC+5uLPI,15分钟后用BD C6仪器检测。（实验过程都是在室温下进行）
问题：
1.实验过程有没有问题？
2.D组这样调的光补偿和划的十字门可以吗？
3.图B2单染FITC没有染上？图B组是按照D组调的光补偿和划十字门，但是图都看起来很奇怪？
4.B组如何调的光补偿和划十字门？

niwanmao

1和2 ，可以。
3和4，B组和D组是否不同的细胞？B组的FL2通道背景高于D组，如为同一种细胞，考虑可能是活力不同引起。B组所有的设门，可在调节补偿后，参考下述设门方法，红门是早期凋亡，绿门是晚期凋亡或坏死，蓝门是坏死：

Zoravae

niwanmao 发表于 2023-5-8 08:53
1和2 ，可以。
3和4，B组和D组是否不同的细胞？B组的FL2通道背景高于D组，如为同一种细胞，考虑可能是活力 ...

好的 谢谢老师