PBMC细胞检测IFNγ

不停

请问检测PBMC的IFNγ时只能用PMA+离子霉素活化吗？用CD3+CD28抗体活化T细胞可以吗?

niwanmao

CD3和CD28的效果似乎更倾向于使淋巴细胞增殖，见既往的protocol：CD3/CD28微球刺激T细胞扩增
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-8504-1-1.html
(出处: 流式中文网)

不停

niwanmao 发表于 2023-5-29 13:41
CD3和CD28的效果似乎更倾向于使淋巴细胞增殖，见既往的protocol：CD3/CD28微球刺激T细胞扩增
https://www.f ...

那我如果是想检测T细胞和肿瘤细胞共培养后T细胞分泌的IFNγ变化的话，是不是先用CD3CD28激活T细胞，然后与肿瘤细胞共培养，共培养结束之后再用PMA+离子霉素刺激48h，结束前2-5小时用BAF抑制，最后用抗体染IFNγ后上机检测

niwanmao

不停 发表于 2023-5-29 16:33
那我如果是想检测T细胞和肿瘤细胞共培养后T细胞分泌的IFNγ变化的话，是不是先用CD3CD28激活T细胞，然后 ...

虽然作用效果有所不同，但两种刺激方法同时用，我好像没看到过。

如果你检测的是T细胞和肿瘤细胞共培养后IFNγ的变化，我觉得不应该刺激啊，你应该要检测的是T细胞已有的功能吧？那么其刺激应该是由肿瘤细胞来执行才对吧。