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[淋巴细胞相关] 体外诱导小鼠Treg细胞

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发表于 2023-5-30 15:59:25 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏5流星未解决
请教各位老师,做小鼠脾脏naive CD4 T细胞诱导Treg细胞,磁珠分选后加入磁珠偶联的antiCD3/CD28,然后加入IL-2和TGF-β培养5d,结果提示FoxP3基本没有阳性的,重复了好多次,加大TGF至50ng/ml仍阳性比例很少,请教大家有没有诱导成功的经验。

微信图片_20230530155851.jpg
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2023-5-30 17:00:25 | 显示全部楼层
参考站内之前的Protocol试试:

15ng /ml hTGFβ、30U/ml hIL-2、5000ng/ml IFN-g(克隆号XMG1.2)、5000ng/mlIL-4(克隆号11B11)

小鼠脾脏、淋巴结组织体外诱导分化Th1/Th2/iTreg/Th17详细步骤
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-7813-1-1.html
(出处: 流式中文网)
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
 楼主| 发表于 2023-5-30 18:09:50 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2023-5-30 17:00
参考站内之前的Protocol试试:

15ng /ml hTGFβ、30U/ml hIL-2、5000ng/ml IFN-g(克隆号XMG1.2)、5000ng ...

好的 谢谢您
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
 楼主| 发表于 2023-5-31 22:55:34 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2023-5-30 17:00
参考站内之前的Protocol试试:

15ng /ml hTGFβ、30U/ml hIL-2、5000ng/ml IFN-g(克隆号XMG1.2)、5000ng ...

您好,想再请假您一下,参考站内诱导方式,如果诱导后只观察FoxP3表达的话不需要PMA等刺激吧,只需要破膜后标记即可吧?
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发表于 2023-6-1 08:13:17 | 显示全部楼层
promise 发表于 2023-5-31 22:55
您好,想再请假您一下,参考站内诱导方式,如果诱导后只观察FoxP3表达的话不需要PMA等刺激吧,只需要破膜 ...

不用的。
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