检测人外周血时，CD8 marker 总是不完全分群，会存在中等表达的细胞

dongfangyao

各位老师同学！


最近在检测人的外周血，多次结果发现CD8+与CD8-细胞群体之间不是完全分界的(CD4则明显分开)，想请假下大家是否遇到过，有什么原因会导致此种情况...
实验，PBMC CD3/28抗体刺激2-3天，染色未染CD45 CD3

附上圈门（忽视了中间群，圈了细胞集中的那一群）
donor1：



donor2：



donor3：



donor5：

Yuck

图片看不到。不过看问题描述，是不是还是前几次老师说的，克隆号一直导致的空间位阻结合不好。

niwanmao

1、请以后上传图片，务必通过工具栏的上传图片按钮，上传。不能直接复制粘贴。复制粘贴产生的是十六进制，无法加载。

2、这种分布，是很正常的，因为CD8+T细胞本就是存在弱表达的亚群。

dongfangyao

Yuck 发表于 2023-6-3 09:28
图片看不到。不过看问题描述，是不是还是前几次老师说的，克隆号一直导致的空间位阻结合不好。 ...

不好意思，重新上传了

dongfangyao

niwanmao 发表于 2023-6-3 16:35
1、请以后上传图片，务必通过工具栏的上传图片按钮，上传。不能直接复制粘贴。复制粘贴产生的是十六进制， ...

1.好的老师，下次注意。已重新上传。
2.老师那我这个PBMC里面CD8圈门的话是不是要再大一些，从10的2次方的样子开始设门

niwanmao

dongfangyao 发表于 2023-6-13 14:45
1.好的老师，下次注意。已重新上传。
2.老师那我这个PBMC里面CD8圈门的话是不是要再大一些，从10的2次方 ...

需要事先用CD45++、CD3++设门，再圈CD8+信号。