多发性骨髓瘤患者样本的凋亡检测

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各位老师好，我研究生一枚，最近在做一个国自课题，主要是肝素管抽取多发性骨髓瘤的患者的骨髓样本，设计用Annexin/PI的方法检测恶性浆细胞的凋亡和患者体内单核细胞的凋亡。
最近在骨髓样本的前期处理上遇到了难题，想尝试几种方法：（1）Ficoll密度梯度离心法提取骨髓样本单个核细胞之后，然后做CD14表面染色，再加入测的凋亡试剂；（2）用不含多聚甲醛的红细胞裂解液裂解骨髓样本后，再做后续染色和测凋亡。暂时考虑的是ficoll分离液对后续的凋亡检测是否会有影响（凋亡率增高？），因此在前期处理上一直没有确定哪种方法好。。。麻烦各位老师同道给予宝贵的意见

niwanmao

1更好，但是你不是检测骨髓瘤的凋亡吗？为什么染CD14？

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niwanmao 发表于 2023-6-22 21:07
1更好，但是你不是检测骨髓瘤的凋亡吗？为什么染CD14？

谢谢老师，染CD14是因为同时想看一下单核细胞的凋亡，因为做的是单核巨噬细胞方面的研究。

niwanmao

13787876076 发表于 2023-6-22 23:04
谢谢老师，染CD14是因为同时想看一下单核细胞的凋亡，因为做的是单核巨噬细胞方面的研究。 ...

如果要区分群体的话，CD138还是需要加的，但是不建议用肝素抗凝取材，而是EDTA取材，因为肝素会降低CD138表达。