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[结构和原理] 双染的没有明显分群是正常的吗?

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发表于 2023-6-25 16:26:47 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决
各位大佬帮忙看看,第一次做双染跑成这样,是正常的,样本是ips定向分化肝细胞的中间某个阶段,还有APC和PE是不需要补偿的吗(流式仪工程师说是不需要)?
顺便问一下,Fox2A和sox17是要用不同的破膜方式吗?我用的是Triton

微信图片_20230625162218.png


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不需要补偿,查了下BD和Thermo的试剂介绍,两种抗体都可以用0.1% Triton X-100破膜 BD的sox17(clone:P7-969)出现两个峰,然后有一点连续;FoxA2(N17-280)更是只是两个连续峰,没有完全分开 FoxA2: https://www.bdbiosciences.com/zh-cn/products/reagents/flow-cytometry-reagents/research-reagents/single-color-antibodies-ruo/pe-mouse-anti-human-foxa2.561589 sox17: https://www.bdbiosciences.com/zh-cn/products/r ...
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发表于 2023-6-25 16:26:48 | 显示全部楼层
不需要补偿,查了下BD和Thermo的试剂介绍,两种抗体都可以用0.1% Triton X-100破膜
BD的sox17(clone:P7-969)出现两个峰,然后有一点连续;FoxA2(N17-280)更是只是两个连续峰,没有完全分开
FoxA2:
https://www.bdbiosciences.com/zh ... -human-foxa2.561589
sox17:
https://www.bdbiosciences.com/zh ... -human-sox17.562594
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 楼主| 发表于 2023-6-25 17:18:26 | 显示全部楼层
悠游 发表于 2023-6-25 16:26
不需要补偿,查了下BD和Thermo的试剂介绍,两种抗体都可以用0.1% Triton X-100破膜
BD的sox17(clone:P7-9 ...

那就是说不分群?
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发表于 2023-6-26 09:00:15 | 显示全部楼层

这个我确实没做过,不太确定,不过从试剂公司展示的资料来看,FoxA2 (clone:N17-280)确实是连续表达,或者说阳性不明显的。

不知道你用的是什么克隆号,或者你可以咨询一下厂家的技术支持,他们应该会提供给你更多的数据信息。
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 楼主| 发表于 2023-6-26 10:04:00 | 显示全部楼层
悠游 发表于 2023-6-26 09:00
这个我确实没做过,不太确定,不过从试剂公司展示的资料来看,FoxA2 (clone:N17-280)确实是连续表达,或 ...

好的,谢谢
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