荧光值落在负值如何处理

lukequ

我做的CD25单染管，不管如何调电压，总有荧光值落在负值，是否与补偿有关，具体如何处理。

niwanmao

是否与荧光渗漏有关，需要你将各个荧光通道两两组合放出来，逐一确认才行。

若确定无关，则可忽略。

maomao

可以考虑是不是收样时流式激光存在不稳定

lukequ

maomao 发表于 2023-7-19 08:55
可以考虑是不是收样时流式激光存在不稳定

意思是不是可能和流式仪有关

lukequ

niwanmao 发表于 2023-7-19 07:36
是否与荧光渗漏有关，需要你将各个荧光通道两两组合放出来，逐一确认才行。

若确定无关，则可忽略。 ...

老师，两两组合是按补偿调节这样看嘛，我这样调节补偿可以吗？

niwanmao

lukequ 发表于 2023-7-19 10:26
老师，两两组合是按补偿调节这样看嘛，我这样调节补偿可以吗？

你导出的原始数据是2.0的，无法看负值分布，无法帮你判断。

你将所有通道都放出来看，并且把负值分布全都拉出来，不要只看这几个。

lukequ

niwanmao 发表于 2023-7-19 10:44
你导出的原始数据是2.0的，无法看负值分布，无法帮你判断。

你将所有通道都放出来看，并且把负值分布全 ...

老师弄好了，还有3.1文件

niwanmao

lukequ 发表于 2023-7-19 11:09
老师弄好了，还有3.1文件

1、未调节补偿时，未看到你这里呈现的负值信号。
2、CD25的阳性区域很诡异，拖尾这么长？该样本是什么类型，25表达如此之高，如此之强？

lukequ

niwanmao 发表于 2023-7-19 12:43
1、未调节补偿时，未看到你这里呈现的负值信号。
2、CD25的阳性区域很诡异，拖尾这么长？该样本是什么类 ...

样本是小鼠脾脏，研磨后使用淋巴细胞分离液分离的淋巴细胞。我刚开始发的第一张图就是未调节补偿的，有负值，难道与使用的软件有关？是安捷伦的NovoExpres

niwanmao

lukequ 发表于 2023-7-19 13:40
样本是小鼠脾脏，研磨后使用淋巴细胞分离液分离的淋巴细胞。我刚开始发的第一张图就是未调节补偿的，有负 ...

忽略之。