化疗药物无法使细胞凋亡，那么如何用热诱导细胞凋亡？

niwanmao

科研中，凋亡是最常见的检测指标。实验时，往往需要制定阳性对照，以确定试剂性能。
一般大家常用化疗药物去诱导凋亡，但有些FLOWER觉得，化疗药物对他们所用的细胞效果不明显，想知道是否能用热诱导。
论坛内讨论的时候，有站友「努力的阿棋」提出：热诱导是可以的，我之前做过，细胞如果够的话，做个预实验，三个温度点，每个温度点三个时间点，大概摸索一下就可以。

那么，有没有更明确的条件指导呢？搜了一下，2021年有篇文献《Heat shock increases levels of reactive oxygen species, autophagy and apoptosis》研究的是热疗机制，其中的条件，我们或许可借鉴一下：

41.5℃以上的温度具有细胞毒性，然而，非致死温度(39-41 ℃)可以增加细胞防御，如热休克蛋白。这种适应性生存反应，耐热性，可以保护细胞免受随后的细胞毒性应激如抗癌治疗和热休克(> 41.5℃)。自噬是另一个被压力激活的生存过程。在该研究中，作者发现细胞在42 ℃较短加热时间(< 60 min)内自噬增加，酸性囊泡细胞器(AVO)和自噬蛋白Beclin-1、LC3-II/LC-3I、Atg7和Atg12-Atg5的水平升高。42℃热休克可增加ROS水平，42℃时LC3和AVO水平升高被抗氧化剂抑制。因此，42 ℃(< 60 min)热休克时自噬增加是由ROS介导的。

相反，42 ℃热休克较长时间(1-3h)引起线粒体、死亡受体和内质网(ER)通路凋亡和caspases的激活。

在40℃下制备出的耐热细胞在42 ℃下对细胞凋亡的激活具有抗性，此时，可用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤和巴菲霉素使细胞对热休克(42 ℃)诱导的细胞凋亡敏感。




信源：Kassis S, Grondin M, Averill-Bates DA. Heat shock increases levels of reactive oxygen species, autophagy and apoptosis. Biochim Biophys Acta Mol Cell Res. 2021;1868(3):118924. doi:10.1016/j.bbamcr.2020.118924