CD3/CD28磁珠分选激活后，CD45RA/RO如何划门

cxt

各位老师好。我们用CD3/CD28磁珠对冻存的样本进行分选激活后。
染CD45RA,CD45RO,CD197。发现在第二，三天有明显的CD45RA,CD45RO双阳，在后续的检测中也一直有一点点。想问问是不是划门有问题。

这个CD3+和P2是一样的

谢谢大家

niwanmao

刚刚在另一个问题里面回答了你的问题，其实你用这个组合绘制散点图是对的，但分析的时候，不建议用十字门，而是用斜向上，划成左上和右下两部分。

tmr

niwanmao 发表于 2023-7-28 10:47
刚刚在另一个问题里面回答了你的问题，其实你用这个组合绘制散点图是对的，但分析的时候，不建议用十字门， ...

倪老师，我也遇到相同的问题但是到现在没有解决，T细胞分选后激活培养，基本所有细胞CD45RA和CD45RO都是阳性，在结合CCR7就会分析出两种结果，到底以哪一种marker为准呢

niwanmao

tmr 发表于 2023-7-28 15:26
倪老师，我也遇到相同的问题但是到现在没有解决，T细胞分选后激活培养，基本所有细胞CD45RA和CD45RO都是 ...

RA和RO散点图上，分化是一个连续的过程，可能你培养的T细胞在刺激后，恰好处于中间阶段。
设门，我个人还是像前面所说的那样，用斜向右上对角线两分法，分出两部分，设门准确位置可参照正常分群清楚的群体设置好，再应用到其它样本上。

CCR7可分别对RA+ 和RO+两群进行分析。