精子DNA检测，主群体呈现两群

Teasord

请教一下各位老师，有没有遇到精子DNA主群体呈现两群的情况呢?最近我们检测老是遇到主群体呈现两群的情况，重新制备之后，主群体呈现一群的情况了，是我们制备的问题吗?这里是原始数据和图片，麻烦各位老师帮忙看一下，十分感谢。

第一次检测，有异常分群

同一样本，重新制备，无异常

niwanmao

Teasord 发表于 2023-10-27 09:18
分群上还属正常，只是比正常测试。主群多了左侧的一群；也就是提问上的第一个图的P2那一群 ...

这样的话，可能只是操作充分程度上的问题，而与仪器、试剂无关

niwanmao

没看懂，这里FITC和PerCP分别是什么染料？你的目的是什么？

Teasord

niwanmao 发表于 2023-10-26 13:35
没看懂，这里FITC和PerCP分别是什么染料？你的目的是什么？

您好，倪老师，我们是进行的精子DNA的检测，是针对人体精子染色质结构进行的测试，使用吖啶橙染料，通过激光激发双链DNA会呈现绿色荧光，可以FITC接受，而异常结构的染色质，则会呈红光，可以被PerCP接收

Teasord

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Teasord

Teasord 发表于 2023-10-26 14:29
您好，倪老师，我们是进行的精子DNA的检测，是针对人体精子染色质结构进行的测试，使用吖啶橙染料，通过 ...

倪老师，我在下面附了正常的结果图形

niwanmao

Teasord 发表于 2023-10-26 14:29
您好，倪老师，我们是进行的精子DNA的检测，是针对人体精子染色质结构进行的测试，使用吖啶橙染料，通过 ...

哦，那我明白了。

首先，同一个样本，上机多次，如果后面几次不出现，可能仪器偶发的问题，如果后面不再出现，则需考虑对DNA单链染色不佳的可能性

Teasord

niwanmao 发表于 2023-10-26 16:49
哦，那我明白了。

首先，同一个样本，上机多次，如果后面几次不出现，可能仪器偶发的问题，如果后面不再 ...

是的是的，我们还是考虑样本制备流程中出现的问题，我们针对第一管也就是主群体呈现两群的，进行了反复测试，依旧是两群，像您说的染色不佳的情况，可能是哪些原因引起的呢？酸化时间吗？还是样本本身因素会影响呢，比如粘稠度之类的？

niwanmao

Teasord 发表于 2023-10-26 17:45
是的是的，我们还是考虑样本制备流程中出现的问题，我们针对第一管也就是主群体呈现两群的，进行了反复测 ...

当出现这种情况时，DFI的分群如何？

Teasord

niwanmao 发表于 2023-10-26 21:38
当出现这种情况时，DFI的分群如何？

分群上还属正常，只是比正常测试。主群多了左侧的一群；也就是提问上的第一个图的P2那一群