CD4-APC单染，分了两个阳性群

hlm

各位老师，麻烦帮我看看，我做的一个CD4-APC单染，为啥会分两个阳性群呢，多次都是这样

wxd

看FSC/SSC图，你的样品像是外周血或者PBMC，里边有很多种细胞。CD4并不是只在T细胞中表达，在别的细胞表面也是有的。如果楼主想看CD4T细胞的比例或者数量，需要加上CD45和CD3抗体。

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谢谢老师，我的样本是外周血，我主要是评价一下CD4单抗试剂，发现分了两个阳性群有点奇怪

niwanmao

hlm 发表于 2023-11-23 13:41
谢谢老师，我的样本是外周血，我主要是评价一下CD4单抗试剂，发现分了两个阳性群有点奇怪 ...

G1门上面的有些单核细胞可能掉下来，形成CD4弱表达的那个小阳性峰

hlm

niwanmao 发表于 2023-11-23 13:45
G1门上面的有些单核细胞可能掉下来，形成CD4弱表达的那个小阳性峰

谢谢倪老师，我测了好几个样本都是CD4分两个阳性群，但是在T亚群中正常

wmj123456

hlm 发表于 2023-11-23 13:51
谢谢倪老师，我测了好几个样本都是CD4分两个阳性群，但是在T亚群中正常

是正常人的外周血样本吗？排除下抗体本身有没有问题吧，如果有其他的CD4抗体，可以取相同的样本，同时染这两个CD4的单抗

hlm

谢谢，我要排除一下抗体的问题

niwanmao

hlm 发表于 2023-11-23 13:51
谢谢倪老师，我测了好几个样本都是CD4分两个阳性群，但是在T亚群中正常

这是对的呀，我的意思是，CD4弱表达的可能是单核细胞掉下来，你可以将G1放大，把单核圈进去，看看是不是CD4弱表达是不是增多，是的话，那就对了

范晋波

wmj123456 发表于 2023-11-23 22:43
是正常人的外周血样本吗？排除下抗体本身有没有问题吧，如果有其他的CD4抗体，可以取相同的样本，同时染 ...

会有抗体竞争吧。。。。

我是超人我怕啥

hlm 发表于 2023-11-23 13:51
谢谢倪老师，我测了好几个样本都是CD4分两个阳性群，但是在T亚群中正常

1.CD4弱阳性峰可能是单核细胞的表达
2.T亚群中正常是因为T亚群是在CD45阳性的淋巴细胞来看CD3+的总T细胞，这样看CD4+就是正常的，因为单核没有圈进来