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间充质干细胞（MSCs）凭借其能够分化成多种细胞类型并有效调节免疫反应的能力，在治疗领域展现出巨大的潜力。然而，成纤维细胞作为MSC培养过程中的常见污染源，可能会对细胞的产量和功能产生影响。因此，准确地区分MSCs与成纤维细胞显得尤为重要，但由于两者在形态学和免疫表型上存在一定的相似性，这一直是一个颇具挑战性的课题。
<!-- 注：Wharton's jelly是指胎儿脐带中的凝胶状物质，主要由水、粘多糖和少量的胶原纤维组成，在胎儿发育过程中起到保护脐带血管、维持脐带弹性和防止感染的作用。在新生儿出生后，大部分Wharton's jelly会被人体吸收或随脐带剪除。 -->
近期一项研究针对这一问题进行了探讨，通过对源自骨髓、脂肪组织、沃顿氏胶和胎盘的MSCs以及皮肤成纤维细胞进行一组共14个细胞表面标记的分析，发现了若干有助于区分的表型特征，我们对其进行概括和总结，这里有7件事情告诉大家：
- MSCs和成纤维细胞具有惊人的相似特性 尽管MSCs可以分化为专门的细胞类型，而成纤维细胞缺乏这种潜力。但是两者在培养中都表现出纺锤形形态，表达相似的表面蛋白，甚至具有一些免疫调节能力。如果MSC产品被成纤维细胞污染，可能会降低治疗效果，甚至可能引发移植后的肿瘤生长。
- 目前尚无明确的标记物 国际细胞治疗学会提出了识别MSCs的最低标准，包括CD73、CD90和CD105的阳性表达。但许多其他细胞类型也表达这些标签，这使得表型区分变得复杂。寻找只存在于MSCs的独特表面蛋白质的工作仍在继续。
- CD105很好地区分了成纤维细胞和所有来源的MSC MSCs的CD105阳性率始终保持在95-99%，而成纤维细胞的CD105阳性率仅为43%。由于CD105有助于血管发育，因此低表达可能表明成纤维细胞位于结构组织，而非专门的血管系统中。
- 不同来源的MSC，表面蛋白存在差异 胎盘和脐带来源的MSCs的CD14水平较低，而骨髓和脂肪来源的MSCs的CD14水平较高。同时，CD271仅在脂肪来源的MSCs中检测到，而在其他细胞类型中几乎检测不到。
- CD146和CD106将骨髓/脂肪MSCs与成纤维细胞区分开来 CD146帮助细胞迁移，而CD106调节免疫细胞的粘附。这两种表面蛋白在骨髓和脂肪MSCs中的表达显著高于成纤维细胞。这一发现可能有助于从这两种来源中分离出治疗用的MSCs。
- 标记物的组合比较有价值 没有单一的完美蛋白质可区分MSC和成纤维细胞。但是，同时结合CD105、CD106和CD146的表达水平，可以帮助区分脂肪MSCs和成纤维细胞。而CD14、CD105和CD146的组合则能够清晰地分出胎盘和Wharton's jelly MSCs。
- 脂肪组织：CD79a、CD105、CD106、CD146 和 CD271
- 沃顿氏胶（Wharton's jelly）：CD56、CD14 和 CD105
- 骨髓：CD105、CD106 和 CD146
- 胎盘组织：CD14、CD105 和 CD146
- 后续仍需验证
虽然这项研究已经确定了用于改善MSC识别的候选标记物，但通过PCR和免疫组织化学验证差异表达仍然至关重要。随着干细胞疗法的发展，确认从混合细胞群体中纯化MSC的方法也将得到改进。
用于精确识别稀有但有价值的MSCs的表面蛋白质标记研究将继续扩展。标准化阳性及阴性标记物组合，将有助于将再生疗法安全有效地从实验室带入临床。
参考文献：Sober SA, Darmani H, Alhattab D, Awidi A. Flow cytometric characterization of cell surface markers to differentiate between fibroblasts and mesenchymal stem cells of different origin. Arch Med Sci. 2021;19(5):1487-1496. Published 2021 Apr 5. doi:10.5114/aoms/131088
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发表于 2023-12-25 15:18:18
发表于 2024-1-8 15:51:29
