PBMC中CD45阴性细胞群

叶晶

这是采集的外周血经过ficol分离之后的PBMC样本检测结果，想请教一下，第三幅图中最左边CD45阴性的这群细胞是什么，我做实验的时候经常有这群细胞，感觉不是碎片和红细胞，所以想各位大佬帮忙分析一下

niwanmao

为什么觉得不是碎片和红细胞呢？


PS：发帖请选择提问版块，此次先帮你转移过去：
1、基础问题（如仪器、原理、试剂耗材、软件等）
2、临床检测方面（如免疫分型、淋巴细胞亚群等）
3、科研方面（如周期、凋亡、线粒体、DC、巨噬等）
4、流式分选和磁珠分选

zdvfsadb

加上死活染料后排除死细胞也许会好一些？

bslhk

你圈门回去看看FSC/SSC位置，一般就是碎片

叶晶

niwanmao 发表于 2024-1-3 13:55
为什么觉得不是碎片和红细胞呢？

好的倪老师，下次在提问板块，我觉得不是红细胞，是因为我裂解之后沉淀是白色，一点红色也没有，觉得不是碎片，是因为我觉得第一幅图里左下角是碎片，我已经排除了，不知道我的想法是不是对

叶晶

zdvfsadb 发表于 2024-1-3 14:29
加上死活染料后排除死细胞也许会好一些？

谢谢答复，但是我的第三幅图是从第一幅图的P10门里圈出来去了粘连之后的结果

叶晶

zdvfsadb 发表于 2024-1-3 14:29
加上死活染料后排除死细胞也许会好一些？

好的，谢谢，我试一下

范晋波

叶晶 发表于 2024-1-21 22:18
好的倪老师，下次在提问板块，我觉得不是红细胞，是因为我裂解之后沉淀是白色，一点红色也没有，觉得不是 ...

我帮倪老师解答一下，第一，看不到不代表没有，红细胞很小，无论用什么方法，肯定是会有残留的红细胞，第二，细胞碎片区，不单单指的是破裂之后很小的部分，还有一些初步破裂的，还是会有一定大小的，所以FSC的阈值，尽量切到淋巴细胞左侧偏小一点点，你的阈值有点小，第三，CD45阴性不排除有一些细胞没染上的原因，所以，实验条件优化一下，图会比较好看，建议用CD45做阈值，切掉阴性，你再去看前侧向的分布，估计就能看明白了

叶晶

范晋波 发表于 2024-1-22 12:17
我帮倪老师解答一下，第一，看不到不代表没有，红细胞很小，无论用什么方法，肯定是会有残留的红细胞，第 ...

好的，谢谢，明白您的意思

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单看前向侧向感觉整体PBMC细胞状态有点不太好