流式求助：细胞群移位

ccchen945 · 发表于 2024-1-4 16:54:58

近期在做小鼠组织流式时，发现在单染管和混染管中，阳性细胞群体有很大的出入，图1是阴性管，图2是阳性管，图3是混染管中该通道的结果，在上机时已经用上机软件初步调过补偿了。这种情况偶尔也会在其他抗体中出现类似情况，请问下大家这是什么原因导致的呢，应该如何改善呀？

wxd · 发表于 2024-1-5 09:06:21

感觉阳性管像是没加抗体或者阳性管刺激失败了。

niwanmao · 发表于 2024-1-5 09:13:44

意思是这群细胞实际上应该是Ly6G阴性，但在混染管出现了异常增高，是吧？

FCS文件可以上传吗？

862789366 · 发表于 2024-1-5 14:14:04

本帖最后由 862789366 于 2024-1-5 14:15 编辑

阳性管为什么呈现阴性？本身就该是阴性？如果是这样，看看是不是补偿不对

ccchen945 · 发表于 2024-1-7 16:31:21

本帖最后由 ccchen945 于 2024-1-7 18:10 编辑

niwanmao 发表于 2024-1-5 09:13
意思是这群细胞实际上应该是Ly6G阴性，但在混染管出现了异常增高，是吧？

FCS文件可以上传吗？ ...

是的，实际上应该是阴性为主。老师，我上传了FCS文件，HUN是混染管，其余是单染管，CD45因为比较好染就没染单管，混管里有CD45。

还有一个比较疑惑的是，我在单染管中调好了补偿，但是一到混染管中补偿就变了，我发现FVS和Ly-6G的补偿就变化很大。如果在混染管里调补偿的话，图就好看些，但是可以这样调补偿吗，因为一直听说要在单管里调补偿，谢谢！

niwanmao · 发表于 2024-1-8 16:56:32

ccchen945 发表于 2024-1-7 16:31
是的，实际上应该是阴性为主。老师，我上传了FCS文件，HUN是混染管，其余是单染管，CD45因为比较好染就没 ...

从图上看，应该是补偿问题

ccchen945 · 发表于 2024-1-10 20:47:37

niwanmao 发表于 2024-1-8 16:56
从图上看，应该是补偿问题

好的，谢谢！

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