解读0期B系前体细胞：在儿童白血病中检测残留病灶的重要性

niwanmao

针对CD19抗原的免疫疗法，如CAR T细胞疗法和双特异性T抗体，已经成为治疗儿童B细胞急性淋巴细胞白血病（ALL）的有效手段。然而，这些治疗方法也带来了在利用流式细胞仪检测微小残留病（MRD）时面临的新挑战，因为白血病细胞会丢失CD19表达逃避免疫治疗。

在最新发表于《Cytometry Part B：Clinical Cytometry》的研究中，Ramalingam TR等人对儿童ALL患者中CD19阴性的淋巴祖细胞亚群——0期B系前体细胞进行了详细研究。了解这些细胞对于在评估MRD时将其与CD19阴性的白血病细胞区分开至关重要。

为什么了解0期B系前体细胞很重要？
- 在接受抗CD19治疗的ALL患者中，白血病细胞可以通过减少CD19表达逃避CAR-T细胞或抗体杀伤。这使得它们在使用传统CD19设门难以被检测到。
- 0期B系前体细胞是CD19阴性的，评估残留病灶时可能被误认为是残留白血病细胞。
- 区分0期B系前体细胞和白血病细胞对于在抗CD19治疗后避免假阳性MRD结果至关重要。

0期细胞的关键信息
- 无论MRD状态如何，都能在含有CD19+B系前体细胞的骨髓样本中观察到。
- 表型稳定
- 表达CD22、CD34、CD38，但不表达CD19、CD20、CD24。
- 与对照组相比，抗CD19治疗后0期细胞的比例显著增加。
- 0期和CD19+造血细胞水平在数量上没有相关性。
- 在诱导治疗后的骨髓中常缺失，但在巩固治疗后易见。


整理一下B系前体各阶段的免疫表型
0期B系前体细胞：
- CD19阴性
- 表达CD22（中等至明亮）、CD34（中等）、CD38（中等）、CD10（微弱）、CD45（微弱）
- 阴性：CD19、CD20、CD24
- 具有相对较高的侧向散射

1期B系前体细胞（CD19+早期B系前体细胞）：
- 表达CD19、CD34、CD10
- 与0期相比，CD22、CD38、CD45水平较低
- 侧向散射较0期B系前体细胞为低

2期B系前体细胞（CD19+晚期B系前体细胞）：
- 表达CD19、CD20（可变）
- 缺乏CD34
- 具有较高的侧向散射

3期B系前体细胞：
- 骨髓中B系的最成熟阶段
- CD19+、CD20+、CD34-
- 类似于正常外周成熟B细胞

综上所述：
- 0期B系前体细胞缺乏CD19表达
- 0期后的所有阶段均表达CD19
- 随着从1期到3期分化，CD34逐渐丧失
- 2期开始表达CD20，并逐渐增强
- 从1期到2期，侧向散射光逐渐增加

0期B系前体细胞在骨髓中的比例
总体范围为占骨髓有核细胞的0.0025%至0.59%。平均水平为0.1%。

检测儿童B-ALL MRD需要考虑
- 在接受抗CD19治疗的患者中，可能只有0期细胞，从而可能被误认为MRD。需要除CD19外的其它标志物辅助。
- 单一的CD24设门可能遗漏0期B系前体细胞和CD19阴性的ALL原始细胞。使用CD22、CD24、cyCD79a的逻辑设门效果更好。
- 采集更多的事件数（> 100万）可以提高检测效果。
- 与其他治疗阶段相比，诱导后的骨髓中0期细胞较少。
- 定量0期B系前体细胞对解释MRD结果至关重要，但其水平与CD19阳性细胞无关。

未来研究方向
- 研究0期B系前体细胞在治疗中的免疫表型变化，类似于对CD19阳性细胞所做的研究。
- 研究抗CD19治疗中0期细胞的调控和持久性。
- 探讨0期B系前体细胞在MRD阴性病例中的预后意义。

参考文献：Ramalingam TR, Vaidhyanathan L, Muthu A, Swaminathan VV, Uppuluri R, Raj R. Deciphering stage 0 hematogones by flow cytometry in follow-up bone marrow samples of pediatric B-Acute lymphoblastic leukemia cases: A potential mimicker of residual disease after anti CD19 therapy. Cytometry B Clin Cytom. Published online January 19, 2024. doi:10.1002/cyto.b.22159