CBA检测血清中的IFN TNF IL2 IL6

叶晶 · 发表于 2024-1-21 22:30:21

各位同仁，我最近在做CBA检测的方法学，检测TNF IFN IL2和IL6,我用血清和试剂盒中的标准品预混，然后通过计算回收率评判结果，四个因子中最稳定的是TNF，检测结果可接受，IL6/IL2不稳定，IFN回收率一直很低，低到只有20%-40%，试过不同人的血清，试过高速离心血清样本，孵育前样本稀释（稀释2倍 4倍 8倍），但是血清对检测的干扰一直没有降低，不知道大家有没有遇到这个情况，能否提供一些解决建议或者原因摸索方向。下面是我使用的试剂盒信息。

niwanmao · 发表于 2024-1-22 08:02:04

不要用血清，改用血浆，可提高回收率

maomao · 发表于 2024-1-22 08:51:34

这个不管血浆还是血清本身就是会对这个试剂盒产生干扰的，可以看说明书的，里面有加标回收率的内容的，原倍加标的话，干扰最大，可以考虑稀释2倍，4倍去做加标实验，这个干扰就会减少的，回收率可能能到80%以上吧，但同时带来的就是样本能被检测出的下限值就偏高了。

范晋波 · 发表于 2024-1-22 12:07:34

要做血清的话，可以用促凝管试一下~

叶晶 · 发表于 2024-1-23 13:42:59

niwanmao 发表于 2024-1-22 08:02
不要用血清，改用血浆，可提高回收率

倪老师，我是先用了血浆，发现不行，所以换成了血清

叶晶 · 发表于 2024-1-23 13:43:38

范晋波发表于 2024-1-22 12:07
要做血清的话，可以用促凝管试一下~

您好，我现在就是用的促凝管收集的血清样本

叶晶 · 发表于 2024-1-23 13:48:43

本帖最后由叶晶于 2024-1-23 13:51 编辑

maomao 发表于 2024-1-22 08:51
这个不管血浆还是血清本身就是会对这个试剂盒产生干扰的，可以看说明书的，里面有加标回收率的内容的，原倍 ...

您好，我稀释8倍也做过，确实越稀释回收率会越高，但是我实际情况肯定是不允许稀释太多倍的，说明书写的是至少稀释四倍，其实稀释四倍我觉得都已经挺多了

，但是我稀释四倍，不管高浓度还是低浓度最高回收率也只有60%左右（我昨天加了双倍的IFN捕获微球和检测试剂，发现回收率提高了一些）

Yuck · 发表于 2024-1-23 14:37:27

没做过CBA的方法学。只是研发用。真要放行多因子检测，通用方法一般不是MSD吗？如果加标过不了是否考虑换方法？

niwanmao · 发表于 2024-1-23 16:05:09

叶晶发表于 2024-1-23 13:48
您好，我稀释8倍也做过，确实越稀释回收率会越高，但是我实际情况肯定是不允许稀释太多倍的，说明书写的是 ...

不应该啊，才这么点啊

有没有可能是仪器状态的问题？

叶晶 · 发表于 2024-1-23 18:47:08

niwanmao 发表于 2024-1-23 16:05
不应该啊，才这么点啊

有没有可能是仪器状态的问题？

应该不是，我试过两台仪器，而且同批其他因子是可以的

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