OMIP-101:27色方案用于分析固定全血中主要免疫细胞

niwanmao

免疫学研究中，流式细胞术起到了至关重要的作用，可以帮助我们鉴定和了解不同的免疫细胞群。然而，随着对免疫细胞认识的不断深入，设计一个完美的流式细胞方案变得有些棘手。

最近在Cytometry杂志上OMIP-101，Imbratta C等人分享了一个经过优化的27色流式细胞方案，能够全面地分析人体血液中的主要免疫细胞。

方案


设门
层级设门策略，见图释和箭头指向：



特色
1、同时涵盖髓系和淋巴系
该方案可分析主要的髓系细胞群，如粒细胞、单核细胞和髓系树突状细胞（DC）。同时，也可分析所有主要的淋巴细胞群，包括T细胞、B细胞、自然杀伤细胞（NK细胞）和固有淋巴细胞（ILCs）。

2、区分T细胞亚群
对于T细胞而言，该方案可以区分常规的CD4+和CD8+ T细胞、黏膜相关的不变T细胞（MAIT细胞）、不变NKT细胞和γδT细胞。

3、定义细胞的分化状态
通过一些标志物如CCR7、CD27、CD45RA等，可分出初始细胞、记忆细胞和效应细胞。

4、分析细胞的功能
细胞因子受体、细胞毒性蛋白和活化标志物的水平可以反映不同细胞类型的增殖能力、杀伤感染细胞的能力以及产生免疫应答的能力。

5、适用于固定的全血样本
该方案一个很大的优点是，即使在使用固定冻存全血样本时，也能得到可靠的结果。如此，在大规模临床试验和多中心研究中具有很高的实用性，因为冻存样本可以简化处理过程。

性能
- 方案覆盖了95%的循环白细胞
- 使用 CD161 和TCR Vα7.2代替四聚体优化 MAIT 细胞的分群能力
- 通过 IgD 和 CD27 表达区分B细胞记忆亚群
- 通过细胞内穿孔素和颗粒酶B分析NK细胞和T细胞的细胞毒性能力
- 通过与新鲜全血样本的结果进行比较，验证方案


这管全面的27色方案，能够实现深度和实用的免疫细胞谱分析。既可用于新鲜全血，或是基于冷冻保存前红细胞裂解和精确体积固定，也可用于PBMC。对于检测错综复杂的免疫微环境变化将是至关重要的。

参考文献：Imbratta C, Reid TD, Toefy A, Scriba TJ, Nemes E. OMIP-101: 27-color flow cytometry panel for immunophenotyping of major leukocyte populations in fixed whole blood. Cytometry A. Published online February 11, 2024. doi:10.1002/cyto.a.24827IF: 3.7 Q2
OMIP-101.pdf (1.09 MB, 下载次数: 24)

2024-2-18 22:09 上传

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Veblen

老师可以具体讲一下画门策略吗，红字标出的能看懂，其他画门有些不太能懂。
另外，B细胞的亚群仅画了门，具体亚群并未标出。
还有不明白CD32在这个panel的的意义。
谢谢啦

niwanmao

Veblen 发表于 2024-2-21 23:52
老师可以具体讲一下画门策略吗，红字标出的能看懂，其他画门有些不太能懂。
另外，B细胞的亚群仅画了门，具 ...

CD24、CD38高表达的Transitional B
其它是常规B


Fc 介导的功能在疫苗接种后预防疟疾中的作用，故作者在方案中纳入了两种 Fc 受体 (FcR)，CD32和CD16

Veblen

niwanmao 发表于 2024-2-22 16:06
CD24、CD38高表达的Transitional B
其它是常规B

谢谢，明白了，一点就懂了