光谱流式需要调节补偿吗？

Veblen

问一个对于我很弱智的问题：

光谱流式有补偿吗？我的理解是没有的

wxd

光谱流式中和补偿对应的是光谱拆分。我理解的原理是：将多个荧光基团分别标记到细胞或微球上（就是做单染管），然后将这些单染分别通过激光器，收集全波长范围内每个波长的荧光强度值，作为这个荧光基团的特征值，比如：DAPI在450nm处有一个最大荧光强度值，在525nm处对应一个小的荧光强度值；FITC在525nm处的荧光强度最大，对应一个值，在580nm处对应一个小荧光强度值。这些荧光基团在各个波长处的荧光强度值是可以随着基团的增多或减少成比例升高或降低。在全染样品中，通过将收集到的各个波长处的荧光强度值与各个荧光基团的特征值进行拟合，即可得到各荧光基团的有无以及对应的数量。

sunny2829

传统仪器补偿调节，光谱仪器光谱解析，其实就是对荧光信号进行拆分，个人认为是一个意思。
类似下图：
[url=]A compensation.png[/url]
[url=]B Spectral unmixing.png[/url]

AAAAAjjj

不需要调补偿，但是要做好单染管的数据，还有别忘了要解析

Veblen

AAAAAjjj 发表于 2024-2-23 10:36
不需要调补偿，但是要做好单染管的数据，还有别忘了要解析

好的，谢谢老师

wmj123456

AAAAAjjj 发表于 2024-2-23 10:36
不需要调补偿，但是要做好单染管的数据，还有别忘了要解析

请问下，光谱拆分具体是怎么做的？是用单染管，上机检测后，先用门划出阴阳性，然后输出这个荧光染料的最大激发波和最大发射光信息？仪器就可以区分出这个染料对应的光谱信息了吗？

AAAAAjjj

wmj123456 发表于 2024-4-15 22:54
请问下，光谱拆分具体是怎么做的？是用单染管，上机检测后，先用门划出阴阳性，然后输出这个荧光染料的最 ...

上机收集单染管数据以后，手动划分阴阳界限，之后就会把这些信息应用到所有的全染管里面了

wmj123456

AAAAAjjj 发表于 2024-4-23 10:48
上机收集单染管数据以后，手动划分阴阳界限，之后就会把这些信息应用到所有的全染管里面了 ...

这步骤是设门吧，还需要录入单个染料的光谱信息吗？在解析的时候，软件怎么知道哪一群细胞是主要的峰群？

niwanmao

wmj123456 发表于 2024-4-23 15:32
这步骤是设门吧，还需要录入单个染料的光谱信息吗？在解析的时候，软件怎么知道哪一群细胞是主要的峰群？ ...

解析的峰，是人为指定的，指定好之后，会生成光谱库，后续测到相同染料，会利用该光谱特征进行unmix

Yuck

cytek用起来其实跟补偿差不多的意思。单染，混染。