求助：CPG+BCR激动剂体外培养PBMC48h，B细胞减少是为啥？

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向各位老师求助！我体外培养PBMC48h后，流式上机CD19+B细胞频率从6-8%减少至0.2-0.4%，请问可能是什么原因导致的呢？
我的培养体系：CPG(3ug/ml)+poly(IgG+A+M)-96孔板48h

niwanmao

BCR激动剂可以刺激原代人B细胞的增殖，使用CPG和BCR激动剂进行体外培养时，理论上应该能够促进B细胞的增殖。如果培养过程中出现了某些因素导致B细胞增殖受阻或减少，是否存在以下可以？
一是培养基成分对B细胞的生长不利，或者培养条件不利于细胞的存活和增殖，可能导致B细胞减少。

具体到CPG和BCR激动剂的组合是否能有效激活B细胞，是否需要摸索刺激的浓度梯度？如果实验设计不当，可能会导致B细胞未能被正确激活或过度激活，从而影响其数量和功能。