Tafasitamab 的诊断迷宫

niwanmao

在血液学领域，通过流式细胞分析评估可测量的残留病灶 (MRD) 是 B细胞非霍奇金淋巴瘤 (NHL) 患者至关重要的疗效监测工具。这种方法有助于治疗后风险分层，并指导风险适应的治疗策略。然而，最近引入的靶向 CD19的新型治疗性单克隆抗体 tafasitamab 揭开了一个耐人寻味的诊断难题- 对MRD的干扰，导致MRD假阳性，从而可能导致不必要的治疗方案更改。

令人困惑的谜题
Tafasitamab 是一种可结晶片段 (Fc) 增强的人源化单克隆抗体，获批用于治疗不适合自体干细胞移植的弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者。目前正在研究其对各种NHL亚型的疗效。在接受 tafasitamab 治疗的2例患者的 MRD 分析期间，出现了非预期细胞群，其特征为：
- 表面免疫球蛋白 (sIg) κ限制性
- CD19 表达减弱
- 不存在 CD10 和 CD5 表达
- 缺乏 CD20 表达（归因于利妥昔单抗治疗结果）

原因何在

比利时的Lisa Proost等人做了一系列实验来寻找原因。

实验1：用不同浓度的tafasitamab（20、200和2000 μg/mL）加标健康志愿者的血样。流式细胞分析发现了：
- 多克隆sIgκ/λ表达的CD19-/CD20+ B细胞（由于 tafasitamab 与 CD19 结合，故在预期范围内）
- 具有强单克隆sIgκ表达、CD16和/或CD56 阳性（提示NK）的CD19dim/CD20-细胞群

实验2：在加标 tafasitamab 之前加入 Fc 受体阻断剂消除了干扰群体的出现，支持 tafasitamab 与 NK 细胞上 Fc 受体结合的假设。


实验3：在不存在B细胞的情况下，加入 tafasitamab 后干扰持续存在，证实其不依赖于B细胞。然而，在一个缺乏NK细胞的样本中，干扰没有发生，证实了NK细胞的作用。

答案揭晓
原因就是：Tafasitamab-NK细胞复合物

这种干扰背后的拟定机制围绕 tafasitamab 的作用方式：
1.抗体依赖性细胞介导的细胞毒性 (ADCC)：Tafasitamab与 B 细胞上的 CD19 结合，激活 NK 细胞释放细胞毒分子。
2.抗体依赖性细胞吞噬作用 (ADCP)：Tafasitamab可增强巨噬细胞对 B 细胞的吞噬破坏作用。
3.直接细胞毒性：Tafasitamab通过 CD19 受体交联诱导半胱天冬酶介导的细胞凋亡。

在 ADCC 通路中，由于 NK 细胞上的 Fc 受体与tafasitamab（IgG1-IgG2κ抗体）的 Fc 部分结合，因此可形成 tafasitamab-NK 细胞复合物。该复合物表现为sIgκ单克隆细胞群，同时表达NK细胞表面抗原CD16和/或CD56。

实际意义和建议
由于 tafasitamab 在 NHL 治疗方案中获得了更广泛的认可，临床实验室在解释流式细胞术 MRD 分析时必须谨慎，以避免误诊残留淋巴瘤细胞和不必要的治疗方案更改。

为了避免这种干扰，可采取的策略包括：
1. 探索用于 B 细胞设门的替代抗原，最好使用所有B细胞阶段表达的抗原（例如cyCD22）。
2. 染色前进行 Fc 受体阻断。
3. 考虑到患者的治疗史和临床背景，在解释 MRD 结果时应提高警惕。

通过以上策略，就可以避免误判，确保接受 tafasitamab 治疗的患者的准确 MRD 评估和最佳临床决策。


参考文献：Proost, L., Lambrecht, S., Hofmans, M., De Vriendt, C., Speeckaert, M., Bonroy, C., Denys, B., & De Bruyne, S. (2024). Flow cytometry interference in patients treated with tafasitamab: Unraveling the diagnostic maze. HemaSphere, 8(1), e39. https://doi.org/10.1002/hem3.39IF: 6.6 Q1