MDSC及其亚群的分析设门，其实很简单

niwanmao

髓源性抑制细胞(Myeloid-derived suppressor cells, MDSC)已成为慢性炎症性疾病相关研究的核心焦点，涵盖自身免疫疾病、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、移植排斥、感染以及癌症。在癌症中，MDSC在调控免疫反应中扮演关键角色，其增多与肿瘤进展、免疫治疗效果受限及较差的生存率紧密关联。流式细胞术作为一种强大的技术手段，被广泛应用以对MDSC进行详尽分析。尽管目前可以用一系列表面标记用于识别人类样本和小鼠模型中的MDSC，但不同研究团队在流式细胞术分离与分析这些细胞的方法上存在差异。

精准鉴定与表型解析MDSC对于阐明其在病理生理过程中的作用及其对疾病预后的影响至关重要。

MDSC依据细胞表面表型主要划分为多形核粒细胞来源MDSC (PMN-MDSC)、单核来源MDSC (M-MDSC)以及早期MDSC (e-MDSC)三大亚群。
- 人PMN-MDSC特征为CD11b表达较弱(或CD33表达较弱)、CD14阴性、CD66b阳性(或CD15阳性)、HLA-DR阴性；而M-MDSC则表现为CD11b高表达、CD14阳性、HLA-DR阴性/低表达、CD66b阴性。早期MDSC(e-MDSC)，这一非典型亚群具有CD11b dim、CD14阴性、CD66b阴性、HLA-DR阴性的特点。
- 小鼠PMN-MDSC亚群定义为CD11b阳性、Gr1阳性、Ly6C低表达、Ly6G阳性，而M-MDSC则定位于CD11b阳性、Gr1阳性、Ly6C高表达、Ly6G阴性。

定义MDSC的基本条件包括以上所述的表面表型标志物，然而要全面确认细胞为MDSC，还需评估其功能特性，并在可行的情况下探究其生化和分子特征。虽然成本高昂且耗时较长，但在啮齿类动物研究中，常采用MDSC对T细胞增殖的免疫调节活性进行功能分析。遗憾的是，在人类样本中由于实际操作限制，如样本量不足等问题，此类功能分析并不常见，难以实现MDSC与T细胞的纯化分离后再进行评估。


下图是PMN-MDSC和M-MDSC的设门策略。Lin组合包括了CD3、CD19和CD20。虽然图上未标注早期MDSC(e-MDSC)的门及其名称，但在健康人样本中，其位置就在最后一个子图的左下象限，即CD3/19/20/56-、 HLA-DR-、 CD16-、 CD33 + CD11b + CD14- CD15-的细胞：


MDSC作为功能性抑制细胞，能够分泌抗炎细胞因子、精氨酸酶-1，并产生诸如超氧化物等活性氧物质(ROS)。此外，还表达诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和程序性死亡配体1(PD-L1)等分子。精氨酸酶-1是一种使L-精氨酸转化为L-鸟氨酸和尿素的酶，导致L-精氨酸消耗。这种氨基酸的缺失会削弱T细胞和NK细胞的增殖能力及功能效应，从而瓦解保护性免疫应答。同时，活性氧显著干扰T细胞的功能，包括其增殖、分化和存活能力。

参考文献：Apodaca MC, Wright AE, Riggins AM, et al. Characterization of a whole blood assay for quantifying myeloid-derived suppressor cells. j. immunotherapy cancer. 2019;7(1):230.