th17是否需要同型对照或者fc阻断剂

左眼皮

我有两个师兄（和我不是一个导师，甚至不在一个科室）做小鼠th17都不用fc受体阻断剂和同型对照，说是反正有对照组，但是别的细胞他们会使用。说是根据参考文献，导师的要求。我问既然都有对照组，为什么th17不用这些，别的需要，他们说有的抗体容易出现假阳性。
所以我很疑惑，是th17细胞出现假阳性低吗？所以可以不用这两个东西。发文章th17不要求这两个东西吗？

wxd

几个原因吧。首先，Fc受体阻断在多克隆抗体时代很常见，因为多克隆抗体与Fc受体的非特异性结合导致的背景荧光很强，所以需要做阻断。但现在基本是单克隆抗体，流式抗体的的种属来源和检测物的种属差异比较大的情况下（如兔抗鼠抗体），抗体的Fc段和细胞表面的Fc受体结合的概率很低，所以用不到Fc受体阻断。同型对照的存在是为了在检测表面有Fc受体的细胞时，排除细胞表面的Fc受体对抗体的非特异性结合，但是T细胞表面没有Fc受体，所以同型对照也不需要。
你的师兄大概是用流式抗体的的种属来源和检测物的种属差异比较大的抗体，并且做好了对照组（大概率是FMO对照），所以用不到Fc受体阻断剂和同型对照。

niwanmao

Th17设门标记CD3、CD4、IL-17，分群都很清楚，所以可以不用

HGPWDLH

wxd 发表于 2024-4-16 21:32
几个原因吧。首先，Fc受体阻断在多克隆抗体时代很常见，因为多克隆抗体与Fc受体的非特异性结合导致的背景荧 ...

他这样做需要固定破膜的吧，fc受体不在表面在胞内。另外t细胞表面还是有fc受体的可能比例不高。