流式抗体使用量问题

小13

最近要做一个多色分析实验，买了几种BD的抗体，但是有些抗体没找到COA，而且发货标注的是50ug或者1ml之类的，没有说明能做多少个tests，然后我想了解一下，如果是做滴定的话，一般需要怎么做，我打算从0.1、0.5、1、2、4ul的原液使用量去染一下试试，请问可行吗？（低浓度的稀释10x后加相应体积）
另外想问一下有没有人用过BD的RB545 Mouse Anti-Human TCR Vβ3抗体这款抗体，和Beckman的那个TCR Vβ3-FITC抗体比起来怎么样啊？

我最近用的Beckman的那个TCR Vβ3-FITC抗体染出来的效率很差，不知道是抗体放太久了还是机器没调好。。
求帮帮

niwanmao

滴定的用量，你这个加的方式是可以的。
如果想节省痛量，也可以是倍比稀释后加抗体（如5ul抗体+5ulPBS，随后吸取5ul再加入到5ul PBS，如此梯度稀释下去)


至于TCR Vβ3我们没有用过，但是Beckman那个23个TCRVβ的Kit性能还是不错的

小13

niwanmao 发表于 2024-4-23 20:55
滴定的用量，你这个加的方式是可以的。
如果想节省痛量，也可以是倍比稀释后加抗体（如5ul抗体+5ulPBS，随 ...

奥奥，谢谢解答，另外我还想问一下，抗体滴定的细胞量有要求吗？一定要1E6每个样本吗？

范晋波

小13 发表于 2024-4-25 09:14
奥奥，谢谢解答，另外我还想问一下，抗体滴定的细胞量有要求吗？一定要1E6每个样本吗？ ...

尽量一致，不然滴定没有意义