BD绝对计数管样本体积问题

haohaoxuexi

各位老师好，BD绝对计数管说明书中对于染色操作有以下描述：吸取20μL合适试剂加到金属网上方；吸取50μL抗凝全血加到金属网上方管壁上。。。

绝对细胞数A=阳性细胞事件数X/微球事件数Y*计数管微球数N/测试体积V；
我的疑问是：1.V是否等于50μL？这个体积是否可以在测试中增加或减少？2. 20μL合适试剂为荧光抗体体积吗，可否根据实际需求改变用量？3.说明书为白细胞计数用，有人实际用于血小板计数，是否可行？感谢各位老师解答。

niwanmao

因为第6步还需要加入450ul的溶血素，然后免洗涤，故最终体积是520ul，而实际上通常会把20ul抗体给忽略掉，故直接按500ul计算。

抗体体积可以变

这种微球通常不用于血小板计数，因为体积偏大。

Danni

V应该就是50μL
实际上 总阳性细胞数/阳性细胞事件数X=N/Y A=总阳性细胞数/V 这个V肯定应该是血样的体积 不包含溶血素等
https://mp.weixin.qq.com/s/62Cr95bnf4jlg3AExIo-NA
这个链接也讨论了这个问题

a582749765

V是等于50μL,这个应该是血样体积，这个体积是不能减少的，不然会影响计数。20μL是试剂荧光抗体体积，可根据实际需求改变用量，可以减少用量，可以滴定确定体积。血小板计数的话没搞过，不大清楚。